基于不同外植体的朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’高效离体再生

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ayopr
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朱顶红色彩艳丽,花朵硕大,应用范围广,是国际著名球根花卉。朱顶红自然繁殖率低,目前通常采用分球、扦插和播种等方法繁殖,但其繁殖效率较低,难以满足日益增长的市场需求。利用组织培养技术进行离体快繁是园艺植物最有效的工厂化繁殖方法之一。然而,迄今为止,朱顶红的组培快繁尚未实现产业化生产,技术体系尚不完善。本试验为进一步完善朱顶红高效离体再生技术体系,以朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’两个品种的鳞片、花器官以及无菌苗叶片为材料,研究了不同植物生长调节剂浓度和配比、不同培养条件对各类外植体愈伤组织以及不定芽诱导的影响,以期为实现朱顶红种球工厂化繁殖奠定技术基础。主要试验结果如下:1.以鳞片为外植体,其中TDZ的浓度显著影响诱导效果。最佳外植体为鳞片基部(0.5 cm)。最适愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,其中‘Blossom Peacock’在培养50 d形成愈伤组织(胚性愈伤为100%),诱导率可达80.00%,继续培养30 d形成体细胞胚,将发育的体细胞胚继代在MS培养基中,培养35 d形成小植株;‘Royal Velvet’在培养60 d形成愈伤组织,诱导率为64.29%,继续培养60 d形成不定芽。最适小鳞茎诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+3.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的诱导率分别达到71.43%和70.00%。2.以花瓣(幼嫩花苞中未显色)为外植体时,最佳培养条件为暗培养三周转到光培养(光照16 h/d,光照强度36μmol/m2/s);最佳诱导培养基为MS+0.5 mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的不定芽诱导率分别达到83.33%和77.78%。以花梗为外植体,最佳培养条件为光培养;最佳诱导不定芽培养基为MS+0.5mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的诱导率分别达到37.50%和29.17%。3.以无菌苗叶片为外植体,最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16 h/d(光照强度36μmol/m2/s)下,以叶片凸面与培养基接触方式进行培养。朱顶红不定芽诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘Blossom Peacock’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d天形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘Royal Velvet’在培养45 d后形成愈伤组织,65 d天形成不定芽,诱导率达到66.67%。最适体细胞胚诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L PIC,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的体细胞胚诱导率分别达到66.67%和63.89%。最适不定芽增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L TDZ,‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的增殖系数分别为4.67和3.46。4.综合可见,朱顶红‘Blossom Peacock’和‘Royal Velvet’的最佳外植体为无菌苗幼嫩叶片基部,在光照16 h/d(光照强度36μmol/m2/s)下,以MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA+2.0 mg/L TDZ为最佳不定芽诱导培养基,以MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L TDZ为最佳不定芽增殖培养基,获得大量朱顶红小植株。在不添加激素的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%。将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭:蛭石(体积比)为1:1的基质中,成活率达到100%。
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