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黄瓜是我国设施栽培的主要蔬菜作物之一。由于日光温室蔬菜的专业化和集约化发展,导致设施蔬菜土壤障碍日趋严重,成为设施蔬菜可持续性发展的主要限制因素。为此,本试验以‘津优30’黄瓜品种为试材,采用土壤自根苗栽培的方式,在日光温室进行连续1~23茬的黄瓜连作定位试验,采用磷脂脂肪酸测定方法和高通量测序技术分析微生物真菌群落结构多样性,研究日光温室黄瓜长期连作栽培对土壤微生物种类及真菌群落结构多样性的影响,以期为探索日光温室黄瓜连作条件下土壤障碍发生机制奠定基础。本研究的主要结果如下:1.通过日光温室黄瓜长期连作定位试验,1至23茬黄瓜植株干物质积累、产量、pH和EC值和速效养分均呈波浪形变化,与第1茬次比较,各指标总体没有发生显著差异。2.通过磷脂脂肪酸测定土壤微生物研究表明:各种类微生物含量均呈现波浪形变化,呈现先升高再降低的基本趋势。除去第1茬次外(第1茬次的各微生物种类含量最低),其余茬次之间各微生物含量无显著差异,但随着连作茬次增加各指标总体呈现降低趋势,而且微生物含量组成越来越近似。在微生物种类聚类分析和PCA分析中,第1茬次的微生物含量明显区别于其余茬次,同时在剩余的茬次中,第5和21茬次分别发生较显著的分离,剩余的第9、13和17茬次的微生物含量则基本相似。3.采用高通量测序技术对真菌群落结构多样性研究表明:黄瓜连作土壤真菌物种数量在门到属水平下呈现相似的波浪形变化特点,其中第2~8茬的纲、目、科和属的数目均呈现降低趋势;而在纲和目水平下,在第8~20茬呈现一直升高的趋势;在科和属数目中则呈现一个在第10茬升高,之后持续下降的趋势。在真菌Alpha多样性指标中,第2~8茬次土壤真菌的丰富度及多样性变化呈现持续降低,其中在第10茬次升高,之后丰富度持续下降,但多样性指数在第10-14-20茬次呈现缓慢升高趋势。在聚类分析和PCA分析中,第2、6、8茬次土壤真菌群落结构多样性发生了连续的显著性变化,之后在第10、14、20茬次中真菌群落结构多样性基本相似,即土壤真菌组成趋于稳定。综上所述,本试验通过日光温室黄瓜23茬次的连作定位试验表明,日光温室土壤微生物种类及其真菌种类总体呈现波浪形变化特征,土壤微生物在连作9茬次之前会发生连续的显著变化,之后真菌的群落结构多样性基本呈现一种稳定的状态,并不随连作茬次增加而发生显著变化。