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第一部分：病人血清中IFN-γ与膀胱癌组织中hepaCAM的表达及相关性分析目的：研究膀胱癌患者血清中干扰素-γ（interferon-gamma，IFN-γ）表达和膀胱移行上皮细胞癌中肝细胞黏附分子（hepatocyte cell adhesionmolecule，hepaCAM）蛋白表达及其相关性分析和与临床病理各组参数间的关系。方法：应用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检例33例膀胱癌患者病人及15例健康志愿者血清中IFN-γ的表达量和应用石蜡包埋免疫组织化学法（paraffin waximmunohistochemistry，PIH）检测33例膀胱移行上皮细胞癌及26例癌旁组织中hepaCAM蛋白的表达并明确hepaCAM蛋白表达定位。结果：ELISA结果显示膀胱癌患者血清中IFN-γ的表达量显著低于健康志愿者（P<0.01），IFN-γ与膀胱癌分期及初发或复发有显著差异（P<0.05）；hepaCAM蛋白显著低于癌旁组织（P<0.01），hepaCAM蛋白表达的缺失与膀胱移行上皮细胞癌各项临床病理参数间均无差异（P>0.05），hepaCAM蛋白表达主要定位于细胞膜及细胞核，胞浆中基本不表达。IFN-γ在膀胱癌患者血清中表达降低与hepaCAM蛋白在膀胱癌组织中的表达缺失呈正相关（r＝0.899，P<0.01）。结论：膀胱癌患者血清中IFN-γ表达降低与膀胱癌组织中hepaCAM蛋白表达缺失相关，为深入研究IFN-γ抑制膀胱癌细胞株增殖及分子机制提供了临床证据。目的：探讨干扰素-γ对膀胱癌细胞株T24及BIU-87增殖影响及其分子机制。方法：五种不同终浓度（125U/ml，250U/ml，500U/ml，1000U/ml，2000U/ml）重组人细胞因子IFN-γ处理人膀胱癌T24及BIU-87细胞，分别在24h，48h，72h采用MTT（3-（4，5-Dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide）法检测T24及BIU-87增殖抑制率（inhibition ratio，IR）；以作用浓度为500U/ml IFN-γ作用T24及BIU-87细胞，并设为实验组，未经IFN-γ处理设为空白对照组。流式细胞仪检测（flow cytometry，FCM）T24及BIU-87细胞周期各阶段变化；RT-PCR检测hepaCAM基因表达；Western blot检测hepaCAM及p21WAF1蛋白表达。以肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）作为IFN-γ对照组，经500U/ml重组人细胞因子TNF-α分别作用T24及BIU-87细胞，RT-PCR检测hepaCAM基因表达，WB检测hepaCAM蛋白表达。结果：IFN-γ抑制T24及BIU-87细胞增殖呈时间剂量依赖性（P<0.01）；与对照组相比，实验组经流式细胞仪检测提示细胞G0/G1期比例增高（P<0.01）；RT-PCR结果提示hepaCAM基因表达水平升高（P<0.05）；Western blot结果提示p21(WAF1蛋白表达水平增高，有统计学意义（P<0.01）。IFN-γ仅在基因水平诱导hepaCAM表达，在蛋白水平无表达。经TNF-α作用的T24及BIU-87细胞经RT-PCR及Westernblot均未检测到hepaCAM在基因及蛋白水平的表达。结论：新基因hepaCAM在IFN-γ对膀胱癌细胞株T24及BIU-87增殖调节中可能起作用，并可能通过上调p21WAF1蛋白表达阻滞T24及BIU-87细胞于G0/G1期，而抑制T24及BIU-87增殖。