“龟鹿二仙膏”为传统古方，出自《医便》，方用鹿胶、龟胶、人参、枸杞四味，为阴阳气血交补之剂，可填阴补精，益气壮阳。根据导师多年相关学术临床经验，在“龟鹿二仙膏”的基础上，以益气补肾为基本法则，研制了防治骨质疏松药物“健骨二仙丸”胶囊。观察健骨二仙丸胶囊对骨质疏松症动物模型的治疗效果和探讨其作用机制。 建立骨质疏松小鼠模型应用于中医药研究，用健骨二仙丸治疗卵巢切除小鼠有明显的效果，骨密度升高，骨生物力学显著改善，血钙维持在正常水平，ALP水平显著降低，在抑制骨吸收作用的同时并不引起明显子宫增生，在某些生物力学指标方面优于后17β雌二醇组及Raloxifene组，弹性载荷、弹性桡度、最大载荷等方面表现突出。明显抑制OVX小鼠体内骨吸收活动，而又同时具有Raloxifene不刺激子宫增生等优点，这方面是17β雌二醇所不具有的。 给予健骨二仙丸治疗的卵巢切除大鼠骨密度上升，骨强度和骨韧性保持基本较为完好，健骨二仙丸治疗骨质疏松症不仅在于其增加了骨钙含量，提高了骨量，更在于其促进骨组织Ⅰ型胶原的合成与分泌，为羟基磷灰石提供了赖以沉积的支架，并改善了骨组织的显微结构，从而提高了骨质量，使骨的生物力学性能增强，骨折危险性降低。原位杂交、免疫组化实验显示健骨二仙丸可抑制OVX大鼠升高的iNOS表达，对iNOS mRNA表达有明显的下调作用，提示健骨二仙丸可从mRNA转录水平调控NOS的活性，从而减轻功能亢进的OC性骨吸收，而对骨组织正常生理活动中的eNOS合成，有适度促进作用。健骨二仙丸还可促进骨髓基质细胞向OB转化，可增强OB活动及功能，对OVX大鼠显著降低骨吸收的同时，不抑制骨形成而起到调控或者促进作用，有利于骨组织的重建及骨量的恢复，从而重建骨形成-吸收新平衡偶联。 健骨二仙丸对体外培养的人类成骨细胞株TE-85生长增殖有明显促进作用，增加ALP、AGP的合成并释放，对细胞因子或AG作用下功能活动较低下的细胞活性也可得到一定恢复。并在国内骨科率先应用FITC-Annexin V/PI双标记 广州中医药大学附间深训市中医赐 琴臼 阂土生导师 而劲夫——技术，通过流式细胞仪检测 TE 85细胞生存及凋亡情况，并结合 Bcl．2、Bax免疫组化染色、iNOS含量测定等实验探讨健骨二仙丸防治骨质疏松及其调控一氧化氮的可能机制。实验结果显示健骨二仙丸作用可总结为：促进生理情况下eNOS表达，抑制病理状态下的iNOS产生；在转录，翻译水平对施加有利影响，可使TE 85细胞Bcl毛表达增加而Bax产生下降，从而使成骨细胞在更长时间内保持旺盛的功能状态。可降低凋亡细胞比例，减少骨细胞非正常生理状态下的凋亡，延长其功能活动时间，从而促进骨重建。 以益气补肾为基本法则的健骨二仙丸不同于单纯激素替代疗法，作用不是单一的，如调控细胞间信息传递途径、促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化，增强成骨细胞功能活动，延长其生存时间等，因而是多方面的多位点的集合作用，这种药理作用是调动作用，调节作用，非激素替代作用，对骨质疏松的防治提供了有效合理的途径。