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肉牛的生长速度和胴体重是肉牛品种优劣的重要标准,能够直接影响肉牛经济效益,因此,培育生长速度快,出肉率高的优质肉牛品种是一项有重要的实际意义的工作。牛骨骼肌的发育起始于妊娠早期,骨骼肌的发育经历了间充质干细胞、肌祖细胞、成肌细胞、初级肌纤维、次级肌纤维几个阶段,在多种转录因子的作用下,逐渐在妊娠后期发育成型。为了探索肉牛生长发育性状重要候选基因NCAPG在牛骨骼肌发育中的机理,通过研究NCAPG在体外成肌分化模型中的作用来初步解释其对生长性状的作用机制。主要通过siRNA干扰NCAPG表达的手段,研究NCAPG对牛胎儿骨骼肌来源的成肌细胞有丝分裂和成肌分化的影响,并探究其作用机理。得到主要结果如下:1、用胶原酶消化法从三月龄的牛胎儿骨骼肌组织中分离成肌细胞,用马血清培养基诱导分化,成肌细胞分化能力较强,诱导后大量细胞融合形成肌管,随着分化时间的增加,MYH1、MYH2、MYH3和MYH4的表达量上调,MYOD和MYF5表达下调,MYOG表达量基本稳定;2、在成肌细胞增殖时期,用siRNA干扰NCAPG表达后,成肌细胞有丝分裂的时间比阴性对照组延长了约25%;3、在成肌细胞分化阶段,用siRNA干扰NCAPG的表达后,1.5天时,干扰组成肌分化相关的基因表达量显著高于阴性对照组,4天时,基因表达出现了反转,干扰组成肌分化相关的基因表达量都显著低于阴性对照组;4、分离分化阶段的细胞核和细胞质蛋白,可以看到牛胎儿骨骼肌成肌细胞细胞核中也存在着较高量的NCAPG,表明NCAPG可能会直接作用于分化过程中的细胞染色质,影响基因的表达;5、用siRNA干扰NCAPG 1.5天后,细胞核中染色质压缩相关的组蛋白修饰H4K20me1的量减少了,而H4K16ac的量增加了,表明干扰NCAPG后,染色质的结构变得更加松散了,也可能说明NCAPG和染色质压缩相关的组蛋白修饰存在着直接或者间接的关联;6、siRNA干扰NCAPG 4天后,阴性对照组成肌细胞分化正常,形成了大量肌管,而干扰组的肌管开始凋亡,到5天时,肌管已经全部凋亡消失。