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鸡传染性贫血病毒(chicken anemia virus,CAV)主要引起鸡胸腺、骨髓等免疫器官发生病变,从而导致免疫抑制,容易继发其他病原微生物感染。我们对送检本实验室的病鸡通过CAV抗体阳性率调查,病毒分离和动物回归实验等方法,初步了解安徽省部分地区发病鸡群中CAV感染状况,为防控鸡传染性贫血病提供参考。首先,本研究应用IDEXX鸡传染性贫血病病毒抗体检测试剂盒对来自安徽省126个养殖场送检的共228份鸡血清进行检测。结果显示,126个养殖场中CAV抗体检测呈阳性为70.63%。228份血清样品中有145份呈CAV抗体阳性,总阳性率为63.60%。根据血清样本来源显示,皖南地区CAV抗体阳性率为60%,皖中地区为64.46%,皖北地区为62.22%。不同品种鸡中肉鸡CAV抗体阳性率为42.86%、蛋鸡品种为51.52%、土鸡抗体阳性率为70.83%;不同日龄病鸡中,1-50日龄CAV抗体阳性率52.22%,50-100日龄抗体阳性率为58.82%,100-150日龄抗体阳性率为58.06%,150-200日龄抗体阳性率为86.21%,200日龄以上的抗体阳性率相对最高,为90%。其次,对CAV抗体检测阳性且肝脏出现肿瘤样结节的病鸡,制备病理组织切片,提取肝组织DNA,以PCR方法检测CAV及可能混感的病毒。对2份CAV检测阳性的病料液孵育MDCC-MSB1细胞,观察细胞病变。结果显示,病理组织切片染色结果可见明显的淋巴细胞浸润;扩增结果表明CAV与ALV-J、MDV存在混合感染,从9份肿瘤中检测出8份CAV,其中有5份和ALV-J检测双阳性,对其中2份腿肌出血、胸腺明显萎缩的阳性样品中CAV凋亡素(VP3)基因序列进行同源性分析表明,AHCH-CAV1与EF176599(山东株)同源性最高为100%,而AHCH-CAV2与M55918(德国株)和EF17659(山东株)同源性均为99.4%。最后,将上述PCR鉴定CAV阳性的2个样品经氯仿和双抗处理后孵育MDCC-MSB1细胞并盲传,在光学显微镜下观察细胞病变,并提取DNA进行PCR鉴定;将细胞毒通过卵黄囊接种6d SPF鸡胚,并通过腿肌注射1日龄SPF雏鸡进行回归实验,观察剖检病变并通过PCR检测CAV。结果显示,病料液处理的MDCC-MSB1细胞在第二代和第四代细胞均出现明显肿胀、死亡等细胞病变。PCR检测结果CAV为阳性;在回归试验中,接种13d后,少数鸡胚发育明显受阻,胚体小于对照组,但多数病变不明显。1日龄雏鸡在接种细胞毒21d时剖检,可见腿肌明显出血、胸腺明显出血,部分萎缩等剖检病变;PCR检测结果均为CAV阳性。由此表明,我们成功分离并鉴定了2株CAV安徽毒株(分别命名为AHCH-CAV1和AHCH-CAV2)。综上所述,本研究通过对来自安徽地区病鸡群中CAV血清学调查,应用PCR技术、细胞感染、鸡胚和雏鸡回归实验,分离鉴定了2株CAV,了解了CAV在安徽省部分地区病鸡群中的感染状况,我们的研究结果为防控鸡传染性贫血和CAV相关致病机制的研究奠定基础。