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匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera L.)是一种很重要的多年生冷地型草坪草,具有耐修剪、观赏性高等优点,常用于高尔夫球场果岭及高档草坪中。本研究探究了诱导匍匐翦股颖愈伤组织的最佳条件,建立了高频再生体系。并对匍匐翦股颖愈伤组织进行了玻璃化超低温保存,为匍匐翦股颖细胞工程和基因工程奠定了理论和实践基础,同时对匍匐翦股颖属种质资源长期保存提供了依据。主要研究结果如下:1.建立了匍匐翦剪股颖再生体系:分别以A-4、A-1、帕特三个品种成熟种子为外植体进行愈伤组织诱导,其中品种A-4的愈伤组织诱导率最高,可达74.7%;2,4-D是影响愈伤组织诱导的最重要激素,以4 mg/L为宜,愈伤组织诱导率为73.2%;在MS+4mg/L2,4-D+0.3mg/L6-BA+蔗糖30g/L+琼脂7g/L中可显著提高愈伤组织诱导率,愈伤组织诱导率可达78.6%;继代培养条件:MS+2mg/L2,4-D+0.1mg/L6-BA +0.3mg/LABA+ 500 mg/L水解酪蛋白中对愈伤组织进行继代培养,胚性愈伤组织发生率可达36.8%;芽分化:在基本培养基中添加2mg/L 6-BA,芽的分化率在80%以上;根的诱导:在1/2MS培养基中添加0.5 mg/LNAA;2.探索了玻璃化超低温保存体系:将继代两次的愈伤组织在4℃低温度下预培养5天,常温下用装载液(2mol/l甘油+0.4 mol/l蔗糖)过渡10min,再于0℃下用玻璃化溶液PVS2处理50min,换成新鲜的PVS2迅速投入液氮中保存一小时以上,取出后在30℃水浴中化冻,用MS+1.0mol/l蔗糖溶液洗涤3次,每次10min,细胞存活率可达85.6%。3.超低温前后愈伤组织,过氧化物酶同工酶酶谱没有发生变化,染色体数目没有改变。该研究结果为匍匐翦股颖属植物种质资源的长期保存提供了基础数据。