MiRNA-125a-5p agomir保护脊髓损伤大鼠的血脊髓屏障功能促进运动功能恢复

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目的建立大鼠脊髓打击模型模拟脊髓损伤,通过改变大鼠脊髓损伤后miRNA-125a-5p的含量从而检测miRNA-125a-5p对脊髓损伤后血脊髓屏障的作用及对运动功能的影响。方法选取体重为150g-180g的成年雌性SD大鼠随机分为四组。随机分别为假手术组(Sham组)、脊髓损伤对照组(SCI组)、MiRNA空载基因鞘内注射对照组(NC组)以及miRNA-125a-5p agomir鞘内注射实验组(MiRNA组)。通过RT-PCR分别检测各组目标脊髓节段中miRNA-125a-5p的含量变化。通过蛋白印记实验和免疫荧光时间检测各组检测紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、Claudin-5)的表达差异。通过检测伊文氏蓝的渗出水平评估血脊髓屏障(blood-spinal cord barrier,BSCB)的功能。最后通过尼氏染色和BBB评分判断大鼠脊髓前角运动神经元的保有量及运动功能的恢复情况。结果鞘内导入miRNA-125a-5p agomir后miRNA-125a-5p的含量(1.37±0.04)较SCI组明显上升(P<0.05)。MiRNA组的紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、Claudin-5)的相对表达量(1.16±0.10、2.18±0.11、2.32±0.05)明显高于SCI组,差异具有统计学意义(P<0.05)。MiRNA组BSCB渗出率(6.61±1.34)明显低于SCI组(P<0.05)。MiRNA组大鼠脊髓前角运动神经元的保有量(9.67±1.53)较多且BBB评分结果表明MiRNA组大鼠运动功能恢复明显高于SCI组(P<0.05)。结论脊髓损伤后损伤点miRNA-125a-5p的含量下降影响BSCB的功能致使大鼠后肢运动功严重下降。导入miRNA-125a-5p agomir可显著的减弱脊髓损伤大鼠BSCB中紧密连接蛋白的降解。减少BSCB的渗出率对维持大鼠脊髓内环境的稳定并对运动功能的恢复有重大意义。
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