鸡血藤中黄酮类化合物提取及抗氧化性的研究

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鸡血藤具有活血补血的作用,能使血细胞增加,血红蛋白升高。其中起主要作用的是黄酮类化合物,此类化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、治疗心血管疾病、降低胆固醇等多种作用。本文以鸡血藤为原料,主要做了亚硝酸钠-硝酸铝比色法对鸡血藤中黄酮类化合物的测定条件的研究,提取分离工艺的研究,同时研究了鸡血藤不同溶剂提取物的抗氧化性。主要研究结果如下:1亚硝酸钠-硝酸铝比色法对鸡血藤中黄酮类化合物测定条件的选择。研究结果表明:硝酸铝与黄酮类化合物所形成的络合物在510nm处有最大吸收峰,比色条件为5%的亚硝酸钠,10%的硝酸铝,1mol/L的氢氧化钠,显色时间为15min,使用50%的乙醇溶液定容。在该条件下测定总黄酮含量,其精密度、重复性和回收率的RSD分别为0.92%、0.48%和5.0%,可得结果稳定性较高。2鸡血藤中黄酮类化合物提取溶剂的选择。用水、95%乙醇、50%乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、石油醚8种溶剂,采用浸渍法,以料液比1:30,在50℃的温度下提取120min,通过比较黄酮化合物的提取率,得出使用50%乙醇作为提取溶剂最佳。3鸡血藤中黄酮类化合物提取工艺的优化。本试验在乙醇浓度、提取温度、提取时间、料液比、提取次数等5个单因素试验的基础上,选择了前4个因素进行4因素3水平正交试验研究鸡血藤中黄酮类化合物最佳提取工艺。由正交实验得出的最佳提取工艺为:提取浓度为50%的乙醇浓度,提取温度为80℃,提取时间为3h,料液比1:30,在该条件下鸡血藤中黄酮的提取率最高,为7.75%。4鸡血藤黄酮类化合物的粗分离。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醚等4种溶剂与鸡血藤醇提浓缩物进行两相溶剂萃取对鸡血藤中的黄酮类化合物进行粗分离,实验结果表明:乙酸乙酯萃取物中黄酮化合物的含量最高,其次是乙醚萃取物,石油醚萃取物中的黄酮含量最小。同时研究结果还表明,上述4种提取剂萃取的黄酮量的总和远小于50%乙醇提取物中的含量,表明黄酮类物质的主体仍然在乙醇水溶液中。5以清除率为指标,以VC为对照,研究6种不同溶剂的提取物对羟自由基和超氧阴离子自由基的抗氧化活性。结果表明:在鸡血藤不同溶剂提取物中,对羟自由基的清除作用大小顺序为:50%乙醇提取物﹥乙酸乙酯提取物﹥丙酮提取物﹥乙醚提取物﹥氯仿提取物﹥石油醚提取物;在鸡血藤不同溶剂提取物中,对超氧阴离子自由基的清除作用大小顺序为:50%乙醇提取物﹥乙酸乙酯提取物﹥乙醚提取物﹥氯仿提取物﹥丙酮提取物﹥石油醚提取物。对两种自由基的清除作用比较可知:石油醚提取物和丙酮提取物清除自由基的能力为羟自由基﹥超氧阴离子自由基;其他溶剂提取物对两种自由基的清除顺序一致,清除能力为超氧阴离子自由基﹥羟自由基。另外通过半效浓度与天然抗氧化剂VC相比,50%乙醇提取物对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用分别可以达到VC的2倍和1.88倍。
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