【摘 要】
：
目的 探讨重组腺病毒载体系统AdEasy介导的多药耐药基因（mdr1）反义RNA逆转阿霉素诱导的人肝癌耐药细胞株SMMC7721/ADM的多药耐药性的作用。 方法 设计特异性克隆mdr1基因5′
论文部分内容阅读
目的 探讨重组腺病毒载体系统AdEasy介导的多药耐药基因（mdr1）反义RNA逆转阿霉素诱导的人肝癌耐药细胞株SMMC7721/ADM的多药耐药性的作用。 方法 设计特异性克隆mdr1基因5′端转录起始位点附近长为609bp的片段的引物,提取SMMC7721/ADM细胞的总RNA,RT-PCR扩增mdr1基因片段,定向克隆到载体pMD18-T,进行DNA测序,检测mdr1基因的表达状况。从含全长mdr1 cDNA全长序列的质粒pHaMDR1-1获得mdr1基因片段,将其反向克隆到腺病毒载体AdEasy系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183内进行同源重组,经293细胞包装生成携带反义mdr1基因片段的重组腺病毒pAdEasy-GFP-ASmdr1。检测腺病毒的滴度以及对肝癌耐药细胞株SMMC7721/ADM生长曲线的影响;在体外分别用多重感染复数（MOI）为100的腺病毒pAdEasy-GFP-ASmdr1和pAdEasy-GFP（空白病毒）感染人肝癌耐药细胞株SMMC7721/ADM,并以未处理的SMMC7721/ADM为对照组,在感染腺病毒后不同时间段（24h、72h和120h）检测各组细胞对阿霉素（ADM）和柔红霉素（DNR）的半数致死量(IC50)和耐药倍数（RF）;RT-PCR检测mdr1 mRNA表达强度;流式细胞仪（FCM）检测细胞膜蛋白P-gp的表达和细胞对柔红霉素（DNR）的蓄积程度。用上述三组细胞分别接种于裸鼠腋下建立肝癌移植瘤模型,观察各组平均成瘤时间、成瘤率,定期测定肿瘤的长、宽、高,一旦其中任何一值达到5mm,每周给予一次腹腔内ADM化疗,连续3周。第四周处死裸鼠,
其他文献
樱桃果实在整个生长发育过程中有3次较为集中的脱落,严重影响樱桃的产量.现将落果原因及预防对策简介如下.
对3个不同的桑黄菌株进行营养生长阶段的菌丝特性研究及出黄阶段培养条件的优化,结果表明:SH1501号菌株在菌丝平均生长速度、长势及形态等菌丝表现上要明显优于其他菌株,最佳
通过对中华猕猴桃的磨山４号，磨山５号，武植８０－４，武植８２－１２，武植８２－５等５个雄性株系的花期，产量，花粉生活力，花粉量的观察，并分析与开植３号，武植６号雌株授粉对果实性状影响的结果表明，磨山４号花期长，有效花粉量
《钢琴即兴伴奏》课程的教学必须贯穿大量的实践与应用内容,只有在实践过程中学生才能积累基本的即兴伴奏素材和经验。俗话说得好,“熟读唐诗三百首,不会作诗也会吟”,说的就
1温度对番茄生长发育的影响番茄是喜温但不耐热的蔬菜,生长发育适宜温度20～25℃,但在不同生育阶段对温度的要求不同。种子发芽适宜温度为25～30℃,温度高于35℃则发芽受到影响,
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield
研究背景剖宫产术是产科领域最常见的手术,在处理难产、妊娠合并症和并发症、降低母儿死亡率中发挥了重要作用。围产医学技术的发展日趋完善,相关的各种医疗条件也在不断进步,剖宫产这项手术的安全性也在不断提高,与此同时,世界各国的剖宫产率也随之提高。剖宫产术后肠梗阻为剖宫产术后比较少见的并发症之一,发病机制至今尚未明确,随着剖宫产率的逐年上升,术后肠梗阻的发生率也在逐渐增加,不但危害产妇健康,还延长了患者的
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield