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高F值寡肽是一类含有高支链氨基酸和低芳香族氨基酸的生物活性寡肽混合物，不仅具有辅助治疗肝性脑病、改善肝昏迷程度和精神状态，对于酒精、药物等所引起的急慢性肝损伤也起到了积极的保肝护肝作用。
马氏珠母贝肉是我国南方海水珍珠养殖的副产品，具有高蛋白、低脂肪等特点，但由于缺乏有效的加工手段未能得到充分利用。目前，利用酶工程技术生产生物活性肽是研究的热点。因此，采用酶解蛋白技术制备马氏珠母贝高F值寡肽(High Fischerratio oligopeptides of Pinctadamartensi，PHFP)制品是一种合理利用该资源提高其经济价值的重要途径。本论文以马氏珠母贝肉为原料，采用酶法制备高F值寡肽。研究主要结果如下：
1.为了解原料的构成及特性，研究了马氏珠母贝肉蛋白分离及其氨基酸组成。结果表明，马氏珠母贝肉粗蛋白含量高达74.9％(干基)；各蛋白组分含量依次为：肌浆蛋白>基质蛋白>碱溶性蛋白>盐溶性蛋白；肌浆蛋白、盐溶性蛋白和碱溶性蛋白的分子量分布集中在200kDa-19kDa、200kDa-45kDa和41kDa-3kDa之间。各蛋白组分的F值差异性不显著，均在2-3之间。
2.通过考察酶解产物的蛋白质回收率、水解度及游离出的芳香族氨基酸及支链氨基酸的情况，对PHFP的制备用酶进行筛选。结果表明，胰酶水解产物的蛋白质回收率(90.4％)及水解度(30.2％)均达到最高，并且采用胰酶一步水解能够在相对保留较高支链氨基酸的情况下，有效释放出芳香族氨基酸，因此，选择胰酶作为制备PHFP的最适作用酶，酶解方式采用一步水解。
3.利用Plackett-Burman因素实验设计及单因素试验对酶解工艺进行优化。结果表明，只有热预处理因素对效应函数游离出的芳香族氨基酸与支链氨基酸比值(K)和短肽得率(PRTCA)具有显著性影响，而对效应函数水解度(DH)具有显著性影响的因子分别是反应温度、加酶量和水解时间。单因素优化试验得到胰酶酶解最适作用条件为：pH-8.0、底物浓度-2gpro./100mL、酶解温度-45℃，加酶量4000U/gpro.、水解时间5h。根据最适作用条件制备得到的最佳酶解产物水解度约33％，平均肽链长度PCL为3-4之间，分子量小于5，000Da组分所占比例约45％。
4.分别研究活性炭吸附及凝胶过滤层析脱除胰酶水解产物中芳香族氨基酸的效果，以确定一种有效的脱除方法。结果表明，仅采用活性炭吸附或凝胶过滤层析分离均未能使酶解液的F值达到目标值(>20)。结合两种方法脱除芳香族氨基酸的特性，先将胰酶酶解液采用活性炭吸附处理后，再进行凝胶柱分离，所得目标组分分子量在300-1800Da之间，F值达到24.58，Phe和Tyr的总含量小于1.2％，占有总洗脱蛋白的38.4％，总得率为16.1％(占原料蛋白)，此组分为PHFP制品。
5.利用HPLC对PHFP制品进行初步分离，采用ESI-MS测定PHFP及各分离组分的分子量分布并测定各组分的氨基酸组成。结果表明，PHFP分子量分布主要集中在150-1000Da之间。分离得到三个组成部分中PHFPb和PHFPc的支链氨基酸含量分别提高到30.2％和29.5％。PHFPa、PHFPb和PHFPc分别占PHFP的41.3％、38.8％和19.7％。
6.研究化学反应体系中PHFP清除自由基的活性及对其H2O2诱导L02肝细胞损伤的保护作用。结果表明，PHFP(10mg/mL)对·OH、DPPH·及O2·-三种自由基的清除率分别达到60.8％、50.8％和44.2％。剂量为1mg/mL的PHFP使H2O2诱导L02肝细胞损伤的半数致死剂量LD50提高了19.3％，接近阳性对照15AA(24.3％)及Vc(20.4％)。并且降低了L02肝细胞培养液中的AST，ALT、MDA含量，提高SOD含量及细胞内的CAT及GSH-Px酶活力。
7.采用Caco-2单层细胞模型体外模拟PHFP小肠吸收。结果表明，PHFP在Caco-2单层细胞中的转运存在外排泵的作用。并且，部分PHFP在Caco-2单层细胞转运过程中被细胞中存在的代谢酶所代谢。