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第一部分三七多糖促进入成纤维细胞增殖活性最适浓度的确定目的：探讨三七多糖(panax notoginseng polysaccharides, PNP)对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast, hSFb)增殖活性的最适浓度,为后继开展三七多糖干预成纤维细胞生物学活性研究探索条件。方法：采用不同浓度梯度的三七多糖干预指数生长期的人皮肤成纤维细胞,培养板置5% CO2、37℃培养箱中孵育72小时后,应用MTT比色法检测细胞增殖活性。结果：通过MTT检测0.01 mg/ml-l mg/ml浓度范围内的PNP对体外培养的人成纤维细胞具有促进增殖的作用,与细胞对照组比较具有显著差异(P<0.01或P<0.05)。最终结果显示三七多糖对人成纤维细胞增殖活性的最适浓度为0.5mg/ml (P<0.05)。结论： 三七多糖在一定浓度内可以促进皮肤成纤维细胞的增殖,其最适促增殖浓度为0.5 mg/ml。第二部分三七多糖对体外培养的人皮肤成纤维细胞功能活性的影响目的：探索三七提取物三七多糖对体外培养的人皮肤成纤维细胞功能活性的影响,为临床应用其促进慢性创面愈合提供实验依据。方法：培养第5-7代的皮肤成纤维细胞随机分为实验组(PNP)和对照组(CON),分别给予含0.5 mg/ml的三七多糖的人皮肤成纤维细胞基础培养基(human skin fibroblast essential medium, hSFb-EM)和含等体积PBS的hSFb-EM进行体外培养后：1)以浓度为0.5 mg/ml的三七多糖干预指数生长期的人皮肤成纤维细胞,采用MTT比色法检测药物作用24、48、72、96、120小时后的细胞增殖活性；2)采用羟脯氨酸试剂盒检测培养72小时的PNP组和CON组培养上清液胶原含量；3)以实时定量PCR检测培养72小时的PNP组和CON组hSFb表达促血管生成因子FGF-2、Ang-1、VEGF、PDGF、创伤愈合相关因子TGF-β1、CTGF、α-SMA、Col-1、促炎因子IL-6以及趋化因子SDF-1 mRNA的能力。结果：1)浓度为0.5mg/ml的三七多糖干预的人皮肤成纤维细胞在作用24、48、72、96小时后均具有明显促增殖作用,与对照组比较差异显著(P<0.05)；2)PNP作用人皮肤成纤维细胞72小时后,培养基上清液总胶原含量虽有上升,但与对照组比较无统计学差异(P>0.05)；3)PNP作用72小时后,与对照组相比较,实验组人皮肤成纤维细胞除表达细胞外基质蛋白Col-1α mRNA下调以外(P<0.05),表达其余生长因子mRNA的能力均有不同程度的上调,但并无统计学差异(P>0.05),而促血管生成因子Ang-1 mRNA (P<0.05)和炎症介质IL-6mRNA的表达水平明显增强(P<0.01)。结论：1)0.5 mg/ml浓度的三七多糖可促进体外培养的人皮肤成纤维细胞的增殖活性,并可能通过上调促血管形成因子Ang-1的表达而具有促进创面新生血管形成的作用；2)三七多糖可上调炎症介质IL-6的表达,可能具有调节创面炎症反应的作用；3)三七多糖可下调创面基质成分Col-Ⅰ的表达,是否具