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β-甘露聚糖酶是降解甘露聚糖的重要酶,在油田开发领域表现出巨大的应用潜力,但对该类酶在油藏条件下的适应性及性能等还缺乏认识。本论文针对油田开采中瓜尔胶的酶降解问题,开展了β-甘露聚糖酶产生菌筛选、酶学性质评价及降解特性研究,取得以下成果: 基于DNS显色,通过β-甘露聚糖酶产生菌快速筛选方法,获得7株具有应用潜力的菌株。经16S rRNA基因序列鉴定,产酶菌主要为芽孢杆菌、假单胞菌、肠杆菌、埃希氏菌、布丘氏菌等。 系统评价了菌株Bacillus sp.N16-5所产β-甘露聚糖酶Man-14的酶学性质,为其研究及应用提供了基础数据。研究发现,该酶活性较高、温度和pH适应范围宽、稳定性较好;以瓜尔胶为底物时,温度15-75℃之间,该酶能保留70%以上活性;pH4.0-11.0时水浴4h相对活性大于80%;最适温度70℃、最适pH7.0时,酶活为98.0U/mL。 实验分析了Man-14降解瓜尔胶产物的分子量分布,为其应用,特别是低渗、低孔介质中的应用提供了支撑。温度55-70℃、pH7.0-9.5时,0.49U的Man-14能够在20min内将瓜尔胶粘度从400mPa·s降至5mPa·s以下。GPC和ESI-MS分析表明,在35℃和70℃条件下3小时内,Man-14能够将瓜尔胶分子量从初始的2,000,000Da降至3,800Da,降解产生了十聚糖以内的低聚糖。Man-14对工业品改性瓜尔胶HPG具有良好的降解性能,经3h降解,重均分子量从1,910,000Da降低至19,200Da,而APS降解产物分子量为343,000Da。