木霉菌H6对香蕉枯萎病生防作用的研究

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香蕉枯萎病是由土壤真菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp. cubense)引起的香蕉植株维管束系统性病害。在我国广大香蕉种植区均有发病,其特点是发病快、传染迅速且极难防治,给世界和我国的香蕉产业造成了巨大的危害。木霉作为一类重要的生防真菌,具有适应性强、存在范围广、广谱高效等优点,在植物病虫害生物防治方面应用广泛。木霉菌(Trichoderma spp.)H6是由本实验筛选的具有拮抗作用的木霉菌。本研究通过H6对香蕉枯萎病菌的拮抗机制、H6对香蕉植株抗病性的诱导作用、H6固体发酵工艺的优化及其发酵产物对香蕉枯萎病抗性盆栽试验及H6-恶霉灵对香蕉枯萎病联防盆栽试验等方面的试验,研究H6对香蕉枯萎病的生防作用及其发酵条件。旨在为揭示木霉菌H6对植物病害的生防机制,为木霉菌H6的有效利用奠定基础。研究结果如下:1.通过平板对峙试验、显微镜形态观察、结合检测木霉菌H6的几丁质和β-1,3-葡聚糖酶酶活情况,综合得出木霉菌H6对香蕉枯萎尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race4:FOC4)的拮抗机制为竞争、抗生、重寄生三种拮抗作用共同作用的结果。2.对木霉菌H6施用后香蕉苗诱导抗病性相关的酶活变化进行了检测,结果为:香蕉苗假茎部和叶中的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)都有明显的提高。推断木霉菌H6施用后诱导香蕉植株产生了抗病性,增强植株的抗病能力。3.通过单因素和正交试验相结合确定了木霉菌H6固体发酵的最优基质:(甘蔗渣:玉米粉1:4)75g,接种量20%,含水量50%,蔗糖0.5%,硝酸钾0.5%,牛肉膏0.5%,磷酸二氢钠0.05%,温度为28℃,在此条件下发酵5d,能使产孢量达到1.49x109个/g。盆栽试验表明,与对照相比,施用木霉菌H6的香蕉苗的发病指数明显降低,对香蕉枯萎病菌的防效达到了86.84%。4.测定不同浓度恶霉灵对木霉菌H6菌丝生长、孢子萌发的影响,及恶霉灵-H6联用对香蕉枯萎病防治的盆栽试验效果;结果表明,当30%恶霉灵稀释倍至1500、2000倍时,对木霉菌H6菌丝的生长及孢子萌发影响最小,且稀释1500和2000倍浓度的30%恶霉灵与木霉菌H6联用对病原菌抑制效果最好。与对照相比,混施木霉菌H6固体发酵物和1500倍恶霉灵稀释液防治香蕉枯萎病的效果最好,防治效果为66.12%。
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