AAV9-SERCA2a基因转染对心房颤动影响的实验研究

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目的:探讨转AAV9+SERCA2a基因对急性心房颤动(AF)兔心房肌电重构及结构重构的影响。方法:48只成年健康新西兰大白兔,随机分成为AF组(房颤组,n=12)、rAAV9+EGFP+AF组(9-型腺相关病毒+增强型绿色荧光蛋白+房颤组,n=12)、rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组(9-型腺相关病毒+肌浆网钙ATP酶2a+增强型绿色荧光蛋白+房颤组,n=12)和Control组(对照,n=12)。起搏前30d分别向心包腔内注射携带EGFP和SERCA2a+EGFP基因的rAAV9载体,采用快速心房起搏(频率600次/min)制作急性房颤模型。观察(1)荧光显微镜下观察心肌组织绿色荧光表达情况;(2)观察SERCA2a对起搏0、4、8、12、24h房颤诱发率的变化;(3)观察SERCA2a对起搏0、4、8、12、24h心房有效不应期的变化;(3)应用超声测量左右心房内径、左室射血分数;(4)应用光镜及电镜检测心房组织结构变化;(5)应用免疫组化检测L型电压依赖钙通道蛋白alc亚单位(LVDCC)alc表达的变化。结果:EGFP+AF组兔心肌冰冻切片在荧光显微镜下可见弥漫绿色荧光,rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组的诱发率减少,AERP在AF组和EGFP+AF组间无明显差异(P>0.05),SERCA2a+EGFP+AF组自起搏12h后AERP较AF组和EGFP+AF组缩短程度减轻(P<0.05)。与rAAV9+EGFP+AF组相比较,rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组兔左右心房直径增大,但增加不显著﹙P>0.05﹚;EF值降低,降低不显著﹙P>0.05﹚。与SERCA2a+EGFP+AF组相比较,rAAV9+EGFP+AF组SERCA2a蛋白表达及L型电压依赖钙通道蛋白alc亚单位(LVDCCalc)表达上调及右心房肌病理改变减轻。结论:以rAAV9为载体介导SERCA2a基因转导可有效逆转快速心房起搏兔心房肌的电重构及结构重构,是一种潜在的治疗AF的方法。
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