目的:羟基红花黄色素A是目前临床上常用药,是从红花的花瓣中提取的天然黄色素,主要用于治疗心脑血管性疾病。研究发现红花黄色素A具有抑制血小板聚集、扩张冠脉、改善心脑缺血、清除氧自由基、抗炎、抑制免疫、促进血管内皮细胞的增值多种药理作用。基于既往研究结果,本课题拟探索羟基红花黄色素A(HSYA)能否通过抑制固有免疫系统激活、抑制炎症反应、降低皮片细胞坏死、从而改善同系小鼠躯干皮片离体保存后移植成活率及成活质量。本研究将为开发器官保存液新成分、改进保存方法奠定实验和理论基础,为进一步阐明皮片移植后难以长期存活及难以建立移植耐受状态的机理及运用提供理论依据。方法:建立小鼠皮肤移植模型,将BALB/c(H-2d)雌性小鼠随机分为6组,分别为不给药组、仅腹腔注射组、250μg/ml中浓度组、2500μg/ml高浓度组、250μg/ml中浓度联合用药组、2500μg/ml高浓度联合用药组,再根据不同保存时间将六组随机分为保存0、3、6小时3个亚组,每个亚组5只动物。7天后观察小鼠移植皮片病理改变,并对术后7-13天皮片成活的面积及皮片颜色变化进行评分。结果:1、成活面积评分结果(1)即行移植(间隔0h)组中,在7、9、11、13天,小鼠的成活面积变化评分显著高于间隔3h、6h所有组成活面积评分(P<0.05);(2)在间隔3h所有组中,不给药组和仅腹腔注射组的评分最低;中浓度组、高浓度组和高浓度联合用药组的评分走势相似,但中浓度组的评分显著高于高浓度组、高浓度联合用药组(P<0.05);中浓度联合用药组评分最高,在7-13天内评分波动不大,比较平稳,并且在每组中间隔3h与间隔6h随着天数变化可出现明显差异(P<0.05)。(3)在间隔6h所有组中,不给药组和仅腹腔注射组的评分最低,在7-13天波动非常小,几乎无变化;中浓度联合用药和中浓度组的评分最高,但是在7-13天出现显著下降;高浓度组与高浓度联合组的评分完全一样,两根线重叠,这两组的成活面积评分在7-13天内出现缓慢上升,波动不大。2、颜色变化评分结果(1)间隔0h组中,颜色评分在7-9天无变化,而9天之后则出现了明显上升,颜色变化评分显著高于间隔3、6h所有组的颜色变化评分(P<0.05);(2)在间隔3h所有组中,中浓度联合用药组的颜色变化评分最高,这个浓度在四个时间上的颜色变化评分波动不大;对于中浓度组,颜色变化评分次之,在7-11天出现了下滑,但在11-13天又出现了显著上升;不给药组和仅腹腔注射组的评分最低,在7-13天内评分都出现了显著下滑;高浓度和高浓度联合用药组的评分比较接近,并且处于6组的中间位置,这2组的评分在7-11天的时候均出现了略微上升,然而在13天的时候出现下滑;随着天数变化各组中颜色评分在间隔3h与6h之间有显著性差异(P<0.05);(3)在间隔6h所有组中,不给药组7-13天评分最低,中浓度联合用药组与仅腹腔注射组的评分走势一样,都是在7-9天上升,之后就出现了持续下滑。并且中浓度联合用药组的评分显著高于仅腹腔注射组。中浓度组在7-13天内持续下滑。高浓度组在7-11天出现上升,但在13天出现显著下滑;高浓度联合用药组在7-13天内的评分波动不大。3、大体标本和病理切片观察结果(1)从大体标本观察,这几种给药方式中中浓度联合给药后移植皮片存活质量最佳;中浓度浸泡次之,13天后皮片可缓慢恢复;仅腹腔注射给药及不给药皮片不能存活,术后约13天左右皮片挛缩坏死。(2)病理切片显示中浓度联合给药组较无药组皮肤水肿、坏死、脉管增生、脉管周及间质炎性浸润程度均明显减轻。结论:(1)同系小鼠间皮肤移植,皮片离体后即行移植(间隔0h),移植物成活质量最佳,存活率几乎100%。(2)在几组用药实验中,中浓度HSYA液浸泡3h联合每日腹腔注射给药后,皮片移植存活质量最佳,并且在7-13天波动不大,比较平稳;中浓度联合给药间隔6h组评分虽然不及间隔3h组,但明显高于间隔6h的其他组;说明HSYA液在中浓度联合给药对皮片移植后的炎症反应可能有抑制作用,延长皮片的存活时间,并能够促进皮片的成活质量。