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本试验以不同发育阶段、不同基因型的未成熟杉木合子胚为外植体,研究了培养基、生长素、分裂素、脱落酸及油菜素内酯(BL)对杉木胚性组织诱导的影响,也探讨了不同浓度组合的ABA和PEG4000对杉木体胚成熟的作用。通过本次试验,确定了适合诱导杉木胚性组织的未成熟合子胚的发育阶段、基因型。并针对不同的基因型,筛选出了胚性组织诱导率高的最优化配方,解决了杉木胚性组织诱导率低的问题,为建立一个高效的杉木体胚再生系统奠定了基础。本试验主要研究结果如下:1.不同发育阶段的未成熟合子胚对杉木胚性组织的诱导有重要影响。其中受精和原胚阶段的未成熟合子胚最适合用来诱导杉木胚性组织,裂生多胚和优势胚阶段次之。由于较低的诱导率,胚器官分化及成熟期阶段的未成熟合子胚已不宜作为诱导杉木胚性组织的外植体。2.在未成熟合子胚的不同发育阶段,基因型对杉木胚性组织诱导的影响均达到了显著水平。在杉木胚胎发育的受精阶段,6个基因型杉木球果的平均诱导率依次为:己2(15.20%)、洋21(11.38%)、丁79 (10.40%)、丁34(6.9%)、洋38(6.04%)洋18(3.89%)。在杉木胚胎发育的原胚阶段,6个基因型杉木球果的平均诱导率依此为:己2(11.37%)、丁79 (8.18%)、洋38(8.09%)、丁34(5.80%)、洋21(4.47%)、洋18(3.17%)。在杉木胚胎发育的裂生多胚阶段,6个基因型杉木球果的平均诱导率依此为:己2(4.02%)、丁79 (3.44%)、丁34(2.63%)、洋21(2.47%)、洋18(1.29%)、洋38(1.17 %)。在杉木胚胎发育的优势胚阶段,6个基因型杉木球果的平均诱导率依此为:己2(1.63%)、丁79 (1.40%)、洋21(1.31%)、丁34(1.05%)、洋38(0.92%)、洋18(0.88%)。3.培养基和激素组合对杉木胚性组织的诱导也有重要影响,针对不同基因型,筛选出了诱导杉木胚性组织的最优化配方,结果如下: (1)丁34在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精和原胚阶段均为DCR培养基+NAA(1.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。裂生多胚阶段为DCR培养基+NAA(2.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+ KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。优势胚阶段为:DCR培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.05mg/L)。(2)丁79在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精和原胚阶段均为LP培养基+ NAA(1.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。裂生多胚阶段为DCR培养基+NAA(2.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。优势胚阶段为LP培养基+ NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.05mg/L)。(3)己2在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精和原胚阶段均为DCR培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.025mg/L)。裂生多胚和优势胚阶段为DCR培养基+NAA(1.0mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。(4)洋18在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精和原胚阶段均为LP培养基+NAA(1.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.05mg/L)。裂生多胚阶段为DCR培养基+NAA(1.0mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。优势胚阶段为DCR+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。(5)洋21在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精和原胚阶段均为LP培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。裂生多胚阶段为:DCR培养基+NAA(1.0mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。优势胚阶段为LP培养基+NAA(2.0mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。(6)洋38在合子胚不同发育阶段的最优化配方分别是:受精阶段为LP培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。原胚阶段为LP培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.025mg/L)。裂生多胚阶段为LP培养基+NAA(2.0mg/L)+6BA(1.0mg/L)+ABA(0.5mg/L)+BL(0.05mg/L)。优势胚阶段为DCR培养基+NAA(0.5mg/L)+6BA(0.5mg/L)+KT(0.5mg/L)+ABA(1.0mg/L)+BL(0.05mg/L)。4.6个基因型的杉木胚性组织增殖的最优化配方均为DCR培养基+NAA(0.1 mg/L)+KT(0.1 mg/L),两周即可增殖一倍。