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目的：研究转化生长因子-β1(TGF-β1)与神经生长因子(NGF)单独以及联合应用对人牙周膜细胞(HPDLCs)的增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,为人牙周膜细胞损伤后修复提供理论依据。方法：体外分离培养HPDLCs并鉴定,取第五代HPDLCs,对照组用含2%的FBS的DMEM培养液,实验组在对照组培养液基础上,分别加入不同浓度TGF-β1(0.1 ng／ml、1ng／ml、10 ng／ml、50.0ng／ml、100ng／ml)；及不同浓度NGF(0.1μg／ml、1μg／ml、10μg／ml、50.0μg/ml、100μg／ml),每浓度组4孔,于标准环境的孵箱中培养3d后,每孔加入MTT20μl,培养4h后,弃上清,每孔加入150μl DMSO,于振荡仪上充分振荡10min,用酶联免疫检测仪在490nm波长下测定各孔的A值,取平均值做统计学处理。把已经测得最佳效应浓度的TGF-β1、NGF和TGF-β1+NGF按照上述方法加入96孔板,细胞浓度同前,每孔液量为200μl,加因子后第3天用MTT法检测细胞增殖,测定A值,进行组间两两比较。用ALP试剂盒检测ALP的活性。结果：实验所得结果如下：1.与对照组相比,浓度为0.1ng／ml、1ng／ml、10ng／ml、50.0ng／ml、100.ng／ml的TGF-β1单独应用均具有促进HPDLCs增殖,但促进增值的效果不同,其中浓度为10ng／ml的TGF-β1为最佳效应浓度。其促分化的结果为,TGF-β浓度小于0.1ng／ml时,对ALP活性无影响；浓度在0.1ng／ml-10ng／ml时ALP活性明显增加,浓度大于10ng／ml时,ALP活性开始降低,其中浓度为10ng／ml的TGF-β1为最佳的促分化效应浓度。2.与对照组相比,浓度为10μg／ml、50μg／ml、100μg／ml的NGF单独应用具有促进人HPDLCs增殖和分化的生物学作用,其中浓度为10μ／ml的NGF为最佳促增殖效应浓度,浓度为100μg／ml的神经生长因子可显著促进ALP的活性。3.最佳TGF-β1浓度与最佳NGF浓度以及它们联合应用时,对HPDLCs增殖的生物学作用。二者联合应用所测的A值为0.702±0.004(以X±S表示,以下同),而TGF-β1单独应用时所测的A值为0.522±0.06,NGF单独应用测得的A值为0.304±0.020,二者联合应用所测的A值比各自单独应用的A值明显增高,说明联合应用具有协同作用。4.最佳TGF-β1浓度与最佳NGF浓度以及它们联合应用时,对HPDLCs分化的生物学作用。二者联合应用所测的ALP值为0.628±0.004(以X±S表示,以下同),而TGF-β1单独应用时所测的ALP值为0.378±0.005,NGF单独应用测得的ALP值为0.325±0.006,二者联合应用所测的ALP值比各自单独应用的ALP值明显增高,说明联合应用具有协同作用。结论：TGF-β1、NGF两者以最佳效应浓度联合应用具有促增殖和分化的协同作用。