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本研究应用电子显微镜技术,系统地比较了人工感染上述不同来源的三个禽流感毒株(ZM、SG及JC)的实验禽机体的超微病变,旨在了解水禽来源和鸡源来源的AIV引起细胞超微病变的规律及异同,比较并探寻其组织嗜性规律,在细胞和亚细胞水平上为比较不同来源的AIV致病力的差异提供有力佐证。透射电镜超薄切片结果表明上述三个毒株均可引起试验用禽感染机体肝、胰、脾、肾、肺、小脑、大脑、心脏、腺胃和肌肉等实质器官组织细胞的超微病变。其中ZM株感染机体的脾脏、腺胃;SG株的大脑、肾;JC株的小脑、腺胃均可观察到流感病毒粒子;ZM株感染机体的心脏和直肠以及SG株感染机体的胰腺细胞均可观察到细胞凋亡趋向。扫描电镜结果显示这三个毒株均引起感染机体的消化道粘膜上皮细胞和气管粘膜上皮细胞发生微绒毛脱落、纤毛脱落、分泌颗粒增多、细胞游离面破溃等显著的超微病变。其中ZM感染机体的食道、气管、盲肠、腺胃粘膜上皮细胞;SG株感染机体的食道;JC株感染机体的食道、法氏囊、盲肠粘膜上皮细胞均可观察到流感病毒粒子。以上实验结果表明禽流感毒株有组织泛嗜性;禽流感病毒水禽分离株已可致感染机体严重的细胞超微病变,水禽已不单单仅充当禽流感病毒自然宿主的角色。佐证了本课题组前期的水禽禽流感流行病调查结果及相关的生物学特性的研究。本研究所得结果可以作为禽流感病毒生物学致病性的一份详实资料,为以后禽流感病毒的相关研究提供参考和佐证。扬州大学硕士学位论文 用禽流感病毒番鸭分离株ZM(为MuscoVy/Zh ejiang/Z000似5NI)),接种11日龄SPF鸡胚,收集死亡胚尿囊液经适当方法处理后作为免疫原免疫BA工B/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术,细胞融合后经间接ELisA检测,得到一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为B尹,l,制备的单抗腹水效价为18fogZ。免疫印迹(从触ste印一lot)表明所得单抗是针对禽流感HS亚型病毒的基质蛋白(M蛋白)的M、及MZ的。单抗的热稳定性结果表明,腹水单抗分别在37℃、25℃、4℃放置20天,其ELISA效价与一20℃冻存保存的腹水单抗的ELISA效价(1:262144)无差别,说明腹水单抗具有良好的热稳定性。抗体分泌稳定性结果表明,杂交瘤细胞体外连续传代80天后以及液氮冻存的杂交瘤细胞6个月后复苏,仍具有稳定的抗体分泌能力。细胞上清抗体ELISA效价为1:256,腹水单抗ELISA效价仍不小于1:262144。单抗的特异性试验结果表明单抗只与HS亚型的禽流感病毒反应,而不与其它禽类病毒反应。单抗的这些特性为将以此单抗介导的快速诊断H5亚型禽流感的相关研究奠定了坚实的基础,将有良好的应用前景。