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本实验室近年来研究表明Ⅰ型咪唑啉受体（I1-R）是新的调节阿片依赖的重要分子，并提出胍丁胺-I1-R可能构成又一新的阿片依赖调节系统的重要学术观点。本研究旨在通过对I1-R候选蛋白（imidazoline receptor antisera selected protein，IRAS）的生物学特性和功能研究，揭示I1-R分子特征，为深入研究胍丁胺分子作用机制提供较好的生物学基础。本研究首先通过生物信息学分析，以原核表达并纯化的蛋白43.1a-IRAS（10-120残基）为免疫原，制备了可稳定分泌IRAS单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株，并通过免疫印迹、免疫沉淀、间接细胞免疫化学、流式细胞术及免疫组化等方法对腹水抗体的特异性进行了鉴定，证明成功获得特异性的IRAS单克隆抗体，同时实现对IRAS的定性、定量、和细胞（内）定位分析。以IRAS单克隆抗体为研究工具，结合免疫印迹、免疫组化的方法检测IRAS的组织分布、表达；通过间接细胞免疫组化方法检测IRAS的细胞内定位；初步研究了IRAS参与的细胞生长增殖信号转导通路及IRAS对细胞周期的影响。研究结果表明：（1）IRAS组织分布具有特异性、表达形式具有多样性。除在肝脏组织中可以检测到IRAS全长形式外，在外周组织及脑组织中IRAS均以47-60KDa蛋白表达形式为主，并且主要位于组织细胞的胞浆中，说明IRAS的组织分布具有特异性、表达形式具有多样性；（2）IRAS功能的发挥与IRAS结构及其在细胞内定位密切相关。通过对IRAS基因进行结构短截，发现N端缺失PX（phox homolog）结构域后，IRAS细胞定位由原来的胞浆点簇状分布变为胞浆均匀弥散分布，同时IRAS可以引起细胞周期的改变，提示IRAS的功能发挥与其在细胞内定位密切相关；（3）IRAS具有促进细胞生长和存活的能力，这可能与IRAS激活后介导的细胞外信号调节激酶（ERK）、p38信号通路（p38MAPK）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）信号通路激活有关；（4）成功克隆了大鼠IRAS新型剪接异构体，提示IRAS表达形式多样性与存在多种剪接异构体有关。本研究从IRAS基因入手，制备和利用IRAS单克隆抗体，研究了IRAS的分子特征，为证明IRAS是I1-R提供了新证据，也为深入研究I1-R功能的分子机制提供了较扎实的生物学基础。