论文部分内容阅读
第一部分SALL4在儿童白血病中的表达及临床意义目的探讨人婆罗双树样基因4(SALL4)在儿童白血病中的表达及临床意义。方法采用real-time PCR和免疫细胞化学技术检测50例新诊儿童白血病,包括急性前B淋巴细胞白血病(Pre-B-ALL)24例,急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)4例,急性髓细胞白血病(AML)22例及15例免疫性血小板减少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura, ITP)患儿骨髓单个核细胞(BMMNC)SALL4mRNA及蛋白的表达量;动态观察5例白血病患儿新诊和完全缓解后SALL4mRNA变化;分析SALL4mRNA表达水平与临床特征的关系。结果1. SALL4mRNA在新诊Pre-B-ALL、AML的表达量分别为13.89(1.00-63.15)、11.12(2.31-56.59),显著高于对照组1.00(0.29-1.71)(P<0.01),T-ALL的表达量1.48(0.87-4.81)与对照组无显著差异。2. SALL4蛋白在新诊前B-ALL、 AML、T-ALL的表达阳性率分别为83.33%(20/24)、86.36%(19/22)、0(0/4),在15例对照儿童中全部呈阴性表达。在Pre-B-ALL、 AML中的表达与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。在T-ALL和对照组之间无显著差异(P>0.05),与real-time PCR结果一致。3.动态观察的5例白血病患儿完全缓解后SALL4的表达量0.98(0.22-1.09)较新诊时28.64(11.20-87.46)显著降低(P<0.01)。4. SALL4mRNA的高表达与外周血高白细胞计数、高危分型、诱导化疗末期MRD正相关(r=0.424、r=0.403、 r=0.393, P均<0.05);与发病年龄,性别,肝、脾、淋巴结肿大等因素无相关性(P均>0.05)。结论1. SALL4在新诊Pre-B-ALL、AML中存在高表达,完全缓解后表达量显著降低,可能促进了儿童Pre-B-ALL、 AML的发生发展。2. SALL4在Pre-B-ALL、 AML中存在高表达,在T-ALL中阴性表达,提示T-ALL和Pre-B-ALL、 AML有不同的发病机制。3. SALL4高表达与外周血高白细胞计数、高危分型、诱导化疗末期MRD正相关,与发病年龄,性别,肝、脾、淋巴结肿大等因素不相关,有望成为监测治疗和判断预后的新指标。目的探讨芹菜素对U937细胞增殖、凋亡及SALL4表达的影响。方法以不同浓度芹菜素(0、20、40、60μmol/L)处理对数生长期的U937细胞,倒置显微镜观察细胞形态;CCK-8法检测细胞的增殖活力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡; Real-time PCR检测SALL4、C-MYC、CCND1mRNA表达水平;Western blot检测SALL4、BCL-2、Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组相比,芹菜素处理组细胞碎片增多;细胞增殖受抑制,呈时间和剂量依赖性(P<0.05); G2/M期细胞比例增加(P<0.05);凋亡率增加(P<0.05)。芹菜素处理U937细胞36h后,SALL4、C-MYC、CCND1mRNA表达下调,SALL4、BCL-2蛋白表达降低,Caspase-3蛋白表达增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素对U937细胞有抑制增殖、诱导凋亡的作用,并能使U937细胞阻滞在G2/M期,其机制可能与下调转录因子SALL4,调控凋亡相关蛋白BCL-2、Caspase-3,抑制癌基因C-MYC、CCND1的表达有关。