【摘 要】
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目的:探讨三氧化二砷（Arsenic Trioxide,As2O3）与顺铂（Cisplatin,CDP）联合抗人成骨肉瘤细胞株MG-63 的作用性质及其相互作用机制。方法:将MG-63 细胞于37℃,5% CO2等常规条件下传
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目的:探讨三氧化二砷（Arsenic Trioxide,As2O3）与顺铂（Cisplatin,CDP）联合抗人成骨肉瘤细胞株MG-63 的作用性质及其相互作用机制。方法:将MG-63 细胞于37℃,5% CO2等常规条件下传代培养,待细胞进入对数生长期后进行操作。采用以下实验方法:1. MTT 检测:将MG-63 细胞接种于96 孔板,测定CDP 和As2O3 对MG-63 细胞的半数抑制浓度(IC50),然后测定药物终浓度分别为0、As2O3 的IC50、CDP 的IC50、1/2IC50（CDP）+1/2IC50（As2O3）时对MG-63 细胞的抑制率。2. 荧光染色观察细胞凋亡:应用以上四组药物浓度分别作用MG-63 细胞48 小时后,消化下细胞制成1×106/ml 单细胞悬液,然后行丫啶橙（Acridine Orange,AO）和碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）双荧光染色,置荧光显微镜下计数300个细胞,按公式:凋亡细胞数/总细胞数×100%,计算细胞凋亡率并观察照相。3. 琼脂糖凝胶电泳观察各组细胞DNA 断裂情况:MG-63 细胞经四组药物作用48 小时后收集细胞,PBS 洗涤两次,加入5M 碘化钾50μl,震荡30 秒钟,加入210μl 生理盐水和氯仿:异戊醇（24:1）400μl 抽提一次,取上清,加入异丙醇150μl,离心沉淀DNA,70%冷乙醇洗涤、干燥。然后,将DNA 溶于50 μl TE 溶液,1.5%琼脂糖凝胶电泳,EB 染色,观察照相。4. 流式细胞术进行细胞周
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