‘白扇’是从日本引进的优良切花白菊品种,花色洁白、花型端庄,广泛应用于祭祀和殡葬业,市场需求量大,出口韩国、日本、荷兰等国家,目前生产这种切花菊的繁殖以扦插为主,但扦插繁殖速度较慢,种苗花期参差不齐;常规组培虽然能生产开花期整齐一致的种苗,但需要较高的投资(超净工作台、高压灭菌锅等)、生产成本高,不利于规模化生产,为解决常规组培快繁存在的问题,本研究以切花菊’白扇’原种插穗的带腋芽茎段作为外植体,以次氯酸钠为消毒剂,在初代培养基、继代增殖培养基和瓶内生根培养基中添加不同种类和浓度的抑菌剂(代森锰锌、山梨酸钾和次氯酸钠),建立’白扇’开放式组培快繁技术体系,找出外植体的最佳表面消毒条件,筛选出初代培养基、继代增殖培养基和瓶内生根培养基中最适的抑菌剂配方、无根苗瓶外生根和瓶内生根苗移栽的最佳基质配比;以’白扇’母株为对照,采用ISSR分子标记技术,比较开放式继代增殖芽苗与母株的遗传差异,检测开放式增殖芽苗的遗传稳定性。本研究结果可以为切花菊’白扇’种苗产业化生产提供理论依据与技术支持,具有重要的理论意义和实践价值,本研究的主要结果如下:1.确定了外植体的最佳表面消毒条件:以切花菊’白扇’插穗带腋芽茎段为外植体,以不同浓度次氯酸钠进行处理,试验结果表明,外植体最佳的消毒条件为0.1%次氯酸钠消毒15 min,污染率为53.3%,成活率为46.7%。2.确定了开放式培养基中琼脂的最适添加量:在煮好的开放式培养基中添加不同浓度的琼脂粉,搅拌均匀,调好pH,直接分装到培养瓶中,冷却后观察凝固情况,试验结果表明:开放式培养基的琼脂最佳添加量为4.5 g/L,比常规组培培养基的添加量(7.0 g/L)低得多。3.筛选出开放式初代培养的最佳抑菌剂浓度配比组合:在常规组培的最适初代培养基MS+1.0mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA中,添加不同种类和浓度的复合抑菌剂,比较污染率、成活率和芽苗质量,结果表明:开放式初代培养的最佳抑菌剂组合为:50 mg/L代森锰锌+0.010%(v/v)次氯酸钠+5mg/L山梨酸钾,污染率36.7%,成活率63.3%,诱导芽生长良好。4.筛选出开放式继代增殖培养的最佳抑菌剂组合:在常规组培继代增殖培养基MS+1.5 mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA中,添加不同种类和浓度的抑菌剂,以初代诱导的无菌苗带腋芽茎段为接种材料,比较污染率、增殖系数和芽苗质量,结果表明:开放式继代增殖培养的最佳抑菌剂浓度配比组合为:40 mg/L代森锰锌+0.010%(v/v)次氯酸钠+5 mg/L山梨酸钾,平均污染率为10%,平均增殖系数为5.93,芽苗底部叶片有部分枯黄,略差于常规组培。5.筛选出开放式生根培养的最佳抑菌剂组合:在常规组培生根培养基1/2MS+0.1 mg/LNAA中,添加不同种类和浓度的抑菌剂,以继代增殖的3 cm左右无根苗为接种材料,诱导不定根,比较污染率、生根率和生根质量,结果表明:开放式生根培养的最佳抑菌剂浓度配比组合为:40 mg/L代森锰锌+0.010%(v/v)次氯酸钠+5 mg/L山梨酸钾,平均生根率为80%,平均根长为2.93 cm,平均根数8.68根,生根质量较好。6.筛选出开放式组培苗最佳生根移栽条件:将开放式生根苗炼苗不同时间后,移栽到不同配比的移栽基质中,试验结果表明,最佳的炼苗时间为3d,最佳移栽基质为草炭土:蛭石:珍珠岩=2:1:1,成活率100%,植株长势旺盛。7.筛选出开放式培养最佳的瓶外生根条件:将开放式继代组培苗炼苗3d,在60mg/L的NAA溶液中,浸泡不同时间,再移栽到不同的生根基质中,进行生根试验,试验结果表明:继代组培苗在60 mg/L的NAA溶液中的最佳浸泡时间为10 min,成活率为94%;最佳的生根基质为河沙,成活率为100%,生根时间为6 d。8.用ISSR分子标记技术检测了开放式组培苗遗传稳定性:采用ISSR分子标记技术,比较开放式继代组培苗与母株的遗传差异,试验结果表明:15株开放式继代3次的组培苗共扩增出105个条带,其中多态性条带有27个,变异率为23.8%。