嗅鞘细胞原代培养及其与脊髓损伤修复材料的作用研究

来源 :武汉理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fishwatcher
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,利用嗅鞘细胞移植治疗脊髓神经损伤已成为最为引人注目的方法,但是单纯用细胞移植来修复脊髓损伤,缺乏理想的载体,细胞存活时间短,且不能很好地迁移,从而影响了神经修复和功能恢复。因此,为嗅鞘细胞选择合适的支架材料是亟待解决的问题。这些合成材料需要具有生物相容性好、对嗅鞘细胞的黏附性强的特点,同时细胞黏附在其表面以后能够维持很好的活性并持续生长。本研究比较了几种分离与纯化嗅鞘细胞的方法,优选了改良的NASH法作为实验方法,从新生大鼠的嗅球提取嗅鞘细胞,并对其进行了纯化,采用GFAP、P75以及S-100免疫组化染色法鉴定其特性及纯度,结果显示采用改良的NASH法提取和分离的嗅鞘细胞的数量最多,且纯度最高,达80%以上,是一种经济而有效的方法,为本课题的研究提供了嗅鞘细胞。本研究合成了聚乳酸(PLA)和聚(羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸),简称PLGK,以及将PLGK接枝了RGD,合成了PRGD材料,选用1mg/mL的血清白蛋白(BSA)与三种材料作用,通过Bradford法,分别在不同的作用时间,用酶标仪测定并计算三种材料表面的蛋白吸附量,结果显示PLA在最初的2h,蛋白吸附量较PLGK和PRGD多,随:着时间的延长,PRGD吸附蛋白的量有所增加,4小时后,高于其他两者;将三种材料PLA、PLGK和PRGD分别与5%的BSA37℃震荡孵育12h,取出干燥后,采用FT-IR测试三种材料表面,通过比较三种材料与BSA作用前后的光谱图,分析材料对BSA的吸附情况,这一结果与蛋白吸附结果一致。分别在三种材料PLA、PLGK和PRGD表面滴加一滴去离子水,在常温下采用ZAP高温显微镜观测,并摄像,图像处理系统测试水接触角,比较三种材料的亲/疏水性。通过测试水接触角,三种材料的亲水性由强到弱依次为PRGD>PLGK>PLA。将纯化后的嗅鞘细胞分别接种于PLA、PLGK和PRGD材料表面,共培养3天后,通过MTT检测OD值来评价材料表面细胞活性;细胞计数法计算细胞粘附率;环境扫描电镜以及S-100染色后荧光显微镜观察细胞在材料表面的生长状态,结果显示,材料PRGD表面细胞数目多,活性好,细胞粘附率高,细胞生长良好。综上所述,材料PRGD的亲水性强,蛋白吸附性能好,嗅鞘细胞在其表面黏附性高,细胞生长活性强,生长状态良好;材料PRGD是一种细胞亲和性强、生物相容性好的材料。
其他文献
随着社会的发展,空间越来越引起人们的关注。20世纪以前的年代可以说是一部时间的计数器,而当今的时代展现的更多的是与空间相关的内容。空间不仅仅是物理意义上的空间,它更
随着社会的进步,城市化进程加快,人们经济、文化水平得以提高的同时,人们对生活品质也有了更高的要求,在繁忙紧张的工作、生活之余,人们开始关注健康,重视精神上的需求,渴望
目的:颈椎病是脊柱外科常见疾病之一,其发病因素与脊柱生物力学密切相关。在目前研究生物力学的方法中,动物实验、物理实验和体外(尸体)实验都无法达到预期效果,三维有限元(t
企业从上世纪70-80年代开始建立管理信息系统,投入逐年加大,以至于企业IT系统积累平均达十个之多。与企业管理系统日渐增多的高成本相反,企业日新月异的内部和外部的需求变化
业绩管理是在企业战略管理理论的指导下,通过对组织宗旨、预期战略的贯彻和组织业绩的最优化,使员工行为与组织行为保持一致,实现或提高员工业绩,从而使组织业绩最大化。业绩
背景和目的:在目前已发表的相关研究中,对于高血压高出血手术治疗最佳时机的选择仍没有最终定论。本研究的目的是探讨超早期和早期手术对老年组和中年组高血压脑出血(hypertens
目的:探讨颅内蛛网膜囊肿(IAC)的手术指征和手术方法。方法:对我院收治的47例IAC患者的临床表现、影像学资料、治疗方法等临床资料进行回顾性分析,其中额叶、侧裂及颞叶、桥小脑
左旋布比卡因(Levobupivacaine,LEVO)是继罗哌卡因(Ropivacaine,RP)之后又一个纯对映异构体(s-型),其化学名:S-(-)-1-丁基-N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺盐酸盐。研究证明左旋布比卡因在
[目的] 比较BDNF,NT-3在成年啮齿类SD大鼠和灵长类恒河猴脑区的分布,并对恒河猴左侧脊髓半横断损伤后脊髓腹角和右侧大脑皮质运动前区BDNF,NT-3阳性运动神经元表达的时相变化和
碳会计及信息披露作为一项制度机制,成为应对气候风险和建设低碳经济的基础性步骤。由此,不同于以往研究更多关注会计信息透明度,本文以CDP对世界500强公司的调查数据为样本,