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目的：抑郁症是一类世界范围内影响人们生命及功能的常见的,慢性的可致残的疾病,尽管一些遗传家系及神经生物学的研究一定程度上揭示了其发病机制,然而,我们对该疾病的了解仍知之甚少。近年来其发病机制被认为是受多个易感基因与环境因素影响下的细胞级联与神经可塑性的紊乱,而不仅是某类神经递质的增加或减少。值得注意的是,MicroRNA被认为可以调节脑发育。树突棘大小,神经可塑性等,从而可能参与了抑郁症的发病机制,近期研究还表明,MicroRNA可作为锂盐及丙戊酸钠的靶标,MicroRNA与脑关系研究较多的是MicroRNA-134,miR-134可调节突触传递,降低Iim结构域激酶基因的表达,减小树突棘的大小而不影响树突棘的数目。miR-143可作用于BCL-2mRNA,而后者被认为对神经元凋亡有保护作用,miR-34a可作用于GRM-7从而促进神经元存活。考虑到MicroRNA在突触形成等各个阶段的作用,以及抑郁症的发病及治疗可能与突触的形成,成熟及可塑性有关,我们推测MiRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143可能参与了抑郁症的发病与治疗机制。而miRNA在各组织,细胞及血清中表达具备特异性和稳定性使其可能成为各类疾病的生物标记。故本研究目的是1.探讨miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143在抑郁症的发病和治疗机制中扮演的角色。2.初步探讨血浆miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143成为抑郁行为严重程度和药物疗效的客观评估指标的可能性。方法：1.分组：雄性SD大鼠40只,分为下列4组,给药剂量参考目前文献上常用剂量：①FLU干预组：(每组10只)FLU10mg/kg.每两天腹腔注射一次+等体积的生理盐水.②模型组(10只)：腹腔注射等体积的生理盐水每日一次。③模型组+FLU干预组：(分两组,每组10只)腹腔注射FLU 10mg/kg每天注射一次。④正常对照组(10只)：等体积的生理盐水.2.抑郁的模型的建立制作方法：大鼠先适应性喂养一周,再接受21天各种不同的应激,包括冰水游泳(4℃,5min)；热应激(45℃,5min)；摇晃(1次Ps,15min)；夹尾(1min)；禁水(24h)；禁食(48h)；足底电击(电流强度1mA,10sP次,间隔1rmin刺激1次,共30次)。每种刺激2-3次。造模前及造模结束后观察大鼠体重和24h饮用1%蔗糖溶液量的变化。3.旷场实验。本实验于造模前及造模结束后进行。将大鼠放入圆柱开阔箱的正中点,观察大鼠3分钟的活动情况。测定指标包括：(1)水平运动格子数；(2)垂直运动格子数(两前肢离地1cm以上的次数)；(3)排便次数。4.HE染色、尼氏染色检测各组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回锥体细胞数。5. Real Time PCR显示海马、丘脑、皮质、血浆miRNA-34a. miRNA-134. miRNA-143的表达变化6. western blot.及RT-PCR显示海马GRM-7、Limk1、bcl-2蛋白及]mRNA表达变化7.免疫荧光双标显示各组大鼠海马齿状回GRM7与brdu双标阳性细胞,limkl与brdu双标阳性细胞,bcl-2与brdu双标阳性细胞表达的变化。结果：1.在应激第22天,CMS组大鼠体重和蔗糖溶液消耗量均低于CON组(P<0.05),而FLU+CMS组体重和蔗糖溶液消耗量均高于CMS组(P<0.05)；21天慢性应激后,CMS组大鼠的水平运动、垂直运动次数明显少于CON组(P<0.05),其排便次数显著多于CON组(P<0.05)；与CMS组大鼠相比,FLU+CMS组大鼠水平运动、垂直运动次数明显增加(P<0.05),排便次数变化不显著。2.HE染色尼氏染色计数发现,与对照组相比,CMS组海马CA1、CA3区和齿状回锥体细胞数显著降低(P<0.05)。3. Real Time PCR显示海马、丘脑、皮质、血浆miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143的表达变化与CON组相比,CMS组大鼠海马miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143表达增强,FLU+CON组海马miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143表达亦显著增加,差异有统计学意义(p<0.001))；与CMS组相比,FLU+CMS组lmRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143表达显著下降(P<0.001)；四组大鼠丘脑、皮质miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143表达差异无统计学意义。Real Time PCR未检测到miR-143的表达水平。与CON组相比,CMS组大鼠血浆miR-34a表达增强(P<0.05),与CMS组相比,CMS+FLU组、CON+FLU组大鼠血浆niR-34a表达下降(P<0.05)；与CON组相比,CMS组大鼠血浆内miR-134表达下降(P<0.05),与CMS组相比,CMS+FLU组、CON+FLU组大鼠血浆miR-34a、miR-134表达增强(P<0.05)。4. western blot显示RT-PCR显示海马GRM-7、Limk1、bcl-2蛋白及mRNA表达变化与CON组相比,CMS组大鼠海马GRM-7、Limkl、bcl-2mRNA表达下降(p<0.001),FLU+CON组海马GRM-7、Limk1、bcl-2mRNA表达亦显著下降(p<0.001),有统计学意义；与CMS组相比,FLU+CMS组GRM-7、Limk1、bcl-2mRNA表达显著增加(p<0.001)；5.免疫荧光双标显示各组大鼠海马齿状回GRM7与brdu双标阳性细胞,limkl与brdu双标阳性细胞,bcl-2与brdu双标阳性细胞表达的变化。与CON相比,CMS组大鼠海马GRM7与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值、limk1与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值及bcl-2与brdu共同标记细胞数/Brdul阳性细胞数比值下降(p<0.001)), FLU+CON组海马齿状回GRM7与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值、limkl与brdu共同标记细胞数/Brdul阳性细胞数比值及bcl-2与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值上升(p<0.001),与CMS组相比,FLU+CMS组海马齿状回GRM7与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值、limkl与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值及bcl-2与brdu共同标记细胞数/Brdu阳性细胞数比值显著上调(p<0.001)。结论：1.CUMS模型鼠糖水消耗下降,动力及探索活动减少,而氟西汀可增加糖水消耗动力及探索活动。2. MiRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143在CUMS模型鼠海马中表达选择性上调,而在丘脑、皮质的表达变化不明显,呈现出区域特异性,表明抑郁症的发病机制可能与海马mRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143上升有关。miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143所对应的GRM-7、Limk1、bcl-2mRNA在CUMS模型鼠海马中表达下调,表明氟西汀可能通过直接作用于miRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143,对GRM-7、Limk1、bcl-2mRNA进行转录后的负调控从而发挥抗抑郁效应。3. MiRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143分别对应的GRM7、limk1、bcl-2可能对CUMS模型大鼠的神经元再生有调节作用。抗抑郁剂氟西汀可通过调节MiRNA-34a、miRNA-134、miRNA-143而进一步对GRM7、limk1、bcl-2产生影响从而促进神经元再生4.MiR-143在血浆中不表达或表达含量极低。miR-34a血浆的表达水平随着抑郁行为的改善而降低,而miR-134血浆的表达水平随着抑郁行为的改善而升高,miR-134与miR-34a有可能成为抑郁症的生物学标记物。