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目的 研究脑HO系统与学习记忆的关系以及在神经元退行性变和急性脑缺血再灌注损伤中的作用。方法1．给药方法：侧脑室内注射给药法。2．学习记忆测试：被动回避反应（跳台法、避暗仪）；空间定向学习记 忆（Morris水迷宫法）。3．HO表达水平测试：RT-PCR法；Western Blot法；免疫组织化学法。4．凋亡检测：TUNEL法。5．其他方法：放免测定；等离子原子发射光谱测定；浸银染色；生化 测定法。研究内容1．研究经侧脑室给药改变HO和NOS活性对小鼠自发活动、被动回避反 应和空间学习记忆的影响，以及学习行为对HO mRNA和蛋白质表达 的影响。2．研究脑室AlCl3注射诱导神经退行性变及其治疗对动物被动回避学 习记忆的影响，探讨HO（HO-1）在铝致神经退行性变过程中的作用与 机带。 重庆医科大学博士学位论文3．研究改变HO＊l)活性的预处理对小鼠急性不完全前脑缺血再灌损 伤结局的影响。结果l．脑室ZnPPR、L－NNA注射明显抑制HO和NOS 活性。浓度为0．05mVL 的抑制剂分别使HO和 NOS活性下降43％和 42％（Prto．01X 浓度为 0．15mOI／L的抑帘剂分另使二酶活性降低63％和56％沪＜o．of）； 0．05nunol／L和 0．15删1／L的 Hemin使 HO 活性分另升高 1盼（Prto．05） 和28叭Pwto．of人各处理组自发活动计数、避暗仪测定的步入潜伏 期、跳台仪测定的错误次数、电击时间、台上停留时间和下台潜伏 期都无统计学差别(P＞ 0．05厂 Mom s水迷宫末次暗示航行寻台时 间各处理组亦无明显差别(r 0 05h 末次定向航行寻台时间在脑室 注射 HO或抨 NOS抑制剂组都比对照组延长(P＜0．05h 空间搜索测 试穿越原站台区次数显示脑室注射HO或／和NOS抑制剂组都比对照 组减少(Pwto．01或Pwto．05几 经避暗仪、跳台仪和Moms水迷宫 行为训练动物 HO 活性升高 ZI％（尸＜0．05）。RT－PCR提示黑饲动物和 学习训练动物 HO《表达无明显差别(P＞ 0．05h 黑饲动物 HO、表达 低于正常(肛0．01厂 学习训练动物HOl表达高于正常(肛0．01入 Western Blot结果提示黑饲动物和学习训练动物 H0－－2表达亦无明 显差别沪＞0．05厂 但黑饲动物＊习 表达明显低于正常组沪＜ 0．05厂 学习训练动物HO刁表达高于正常组(P＜0．05厂2．脑室AICI。注射后一个月，各组动物自发活动无明显差别(ryo．05h 4 重庆医科大学博士学位论文 与正常对照组相比避暗仪测定的24h后步入潜伏期明显缩短、跳台 仪记录的错误次数明显增加、电击时间明显延长、台上停留时间和 下台潜伏期均明显缩短。(Pt 0．01或 P＜ 0．05儿 皮质醇测定结果显 示脑室大、中、小剂量AICI。注射组比正常组分别升高186兄97晌 62％（Prto．05），尼莫地平（80ms／ks体重）和普拉西坦治疗组（600ms／ks 体重）明显阻遏了AICI＊室注射引起的上述指标异常，但仍不及正 常对照水平(Pwto．01或Pwto．05厂免疫组化研究显示AICI。组HOl 表达强于正常对照组，平均光密度值明显增高(P＜0．01厂 而尼莫地 平和普拉西坦治疗组 HO＊表达虽然也明显高于正常组(P＜ 0．01入 但显著低 于模型组（Pwto．01），Western Blot分析HO－1表达显示同 样结果，而HO《表达无差别(P＞ 0．05人等离子体原子发射光谱元 素分析显示AICI。脑室注射使小鼠脑铝水平明显升高(P＜0．01厂 而 且铁也呈相关性升高（Pwto．of或P＜0．05厂 总钙也与总铝呈相关性 升高沪＜ 0．01厂 但升幅不大，仅高剂量氯化铝组升高明显k＜ 0．05）。 3．小鼠经不完全前脑缺血再灌术后 2周自发活动计数下降(Pt 0．05厂 避暗仪、跳台仪学习记忆成绩明显差于对照组r＜0．01 或尸＜ 0．05人经热休克预处理或脑室氯化正铁血红素注射诱导HOl表达 增强（P＜0．01），HO总活性增加（P＜0．of）；月 室ZnPPIX注射不影响 HO表达水平(P＞ 0．05厂 但酶活性明显下降(Pwto．01卜TUNEL染色 平均光密度分析表明热休克以及脑室氯化正铁血红素注射预处理使 5 重庆医科大学博士学位论文 卜性明显降低（Pwto．01），脑室ZnPPIX注射则明显增强TUNEL卜性（尸 wto．of），热休克合并脑室 ZnPPIX注射 TUNEL阳性仍低 于 ACSF组(P ＜0．05人缺血再灌30分钟时，热休克以及脑室氯化正铁血红素注 射预处理组删A、XOD禾活性?