转BpCCR、BpGH3.5白桦优良株系选择及适应性分析

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林木基因工程育种技术是快速、高效地培育出速生、高抗、材质材性优良的林木良种的有效手段和途径,科研工作者利用基因工程育种技术相继开展白桦抗逆品种及速生品种的创制。研究团队先前获得了一批转BpCCR基因的过表达和抑制表达白桦株系、转BpGH3.5基因的过表达和抑制表达白桦株系,并已经进入中间试验环节,在多地营建了转基因中间试验林。在转基因株系经过多个世代后,开展导入的目标基因遗传稳定性分析、转基因株系生长特性比较、多地点的稳定性与适应性研究是基因工程育种的重要环节。故此,本研究以7年生转BpCCR、BpGH3.5白桦为材料,开展对外源基因遗传稳定性、生长性状的测定,同时进行3个试验地点的生长稳定性分析,选出优良转基因株系,为后续的环境释放试验奠定基础,结果如下:(1)PCR检测表明,转BpCCR、BpGH3.5白桦的外源目标基因均为阳性。qRT-PCR分析显示,BpCCR基因不但在转正义链株系中上调表达,而且在转反义链株系中也呈上调表达;BpGH3.5基因在转正义链株系中上调表达,在转反义链株系中表达量显著下调。(2)转BpCCR正、反义链白桦株系木质素含量均增加,其中10个转反义链株系的Klason木质素和总木质素含量均值较WT株系分别提高了 7.46%和7.05%,木质素含量最高的FCR11株系较WT株系分别提高了 12.26%和11.81%;转基因株系木材密度虽然有一定的变化,但无明显规律。转正义链白桦的木纤维宽明显变小,5个株系均值较WT株系小了 8.82%;而转反义链白桦株系的木纤维长受到明显抑制,有11个株系与WT株系间的差异达到了显著水平,其均值较WT低12.12%。(3)内源游离IAA含量测定显示,转BpGH3.5正义链株系的IAA含量低于或显著低于WT株系,5个转反义链株系均显著高于WT株系,其IAA含量均值高于WT株系的 52.26%。(4)AMMI模型分析表明,FC29、FG12株系综合评价最好,既能同时适应3个试验地点,又能获得高的树高生长量。其中FC29树高较群体均值高8.67%,遗传增益为4.58%;FG12树高较群体均值高9.49%,遗传增益为3.78%。上述株系为后续转BpCCR、BpGH3.5白桦的环境释放提供参考。
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