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视乳头的解剖结构决定了在青光眼性视神经病变中,视乳头上下是最易受损的部位。青光眼的一个特征——进行性的易受损性也提示了在青光眼的发病过程中视乳头发生了某些变化。本课题通过建立猕猴慢性高眼压模型,研究在不同损伤程度时,视乳头活体HRT(Heidelberg retina tomography,HRT)参数以及组织病理学的变化特点,以期对HRT在实验性青光眼动物模型以及临床上的应用有一定的指导意义,对视乳头在青光眼发病机理中的作用有更深入的了解。第一部分:海德堡视网膜断层扫描仪评价猕猴慢性高眼压模型视乳头变化的研究本部分的研究目的是观察HRT检测正常和慢性高眼压猕猴视乳头形态时各参数的变异性;评价HRT各参数之间的相互关系;观察慢性高眼压猕猴HRT各参数的变化情况;HRT活体视乳头参数与组织病理学视神经轴突计数之间的相关性。研究对象为4只正常猕猴和16只行激光光凝小梁网造成的不同时期的慢性高眼压猕猴。在光凝前和光凝后不同时间点(2周~48周)行HRT检测,每次均重复测量3次。分别计算正常和慢性高眼压猕猴3次检查之间的变异性;HRT各参数之间的相互关系;不同时期的慢性高眼压猕猴HRT各参数与正常猴的区别。其中8只慢性高眼压猴最后处死,计算HRT各参数与组织病理学视神经轴突计数之间的相关系数。研究结果显示HRT参数视盘面积、平均视杯深度和最大视杯深度在正常和慢性高眼压猕猴中参数的变异系数均较小;正常和慢性高眼压猴HRT各参数之间的相关性与人类相似;慢性高眼压猴中,HRT各参数均出现了与临床观察发现的相应的变化;HRT各参数能较好地区分正常和不同分期的慢性高眼压猕猴,其中较敏感的参数是杯盘面积比和盘沿面积;杯盘面积比、盘沿面积、杯体积、盘体积、平均杯深、最大杯深)、视杯形态测量指数(CSM)和轴突计数之间有良好的相关性,其中盘沿面积、视杯形态测量指数和杯盘面积比三个参数的相关性最好。第一部分的研究结果表明猕猴慢性高眼压模型视乳头的变化与人类慢性青光眼相似;HRT能较好地反应慢性高眼压猴视乳头形态学的变化;在众多参数中,盘沿面积是用于实验性青光眼动物模型和青光眼患者随访比较理想的参数。第二部分:猕猴慢性高眼压模型视乳头组织病理学研究第二部分的研究目的是观察不同损伤程度的猕猴慢性高眼压模型视乳头视神经在组织病理学上的改变,包括视乳头形态,轴突损伤情况,着重于胶质细胞的变化及其超微结构的改变。研究对象为4只正常猕猴及8只慢性高眼压猕猴。取视乳头行矢状位冰冻切片,用免疫荧光的方法行GFAP抗体标记星型胶质细胞,HLA-DR标记小胶质细胞,CD—68表达的检测。GFAP表达计算阳性区域的面积并观察分布,HLA—DR表达计算其阳性细胞数及阳性面积,分析结果在不同损伤程度时,以及在无髓神经区域(筛板前和筛板区)和有髓神经区域(筛板后)之间的差别。并用透射电镜观察视乳头视神经超微结构的改变。研究结果显示慢性高眼压猴出现轴突不同程度的减少,髓鞘出现继发性的改变。在不同损伤程度的猕猴视乳头中筛板前区、筛板区和筛板后区GFAP表达均增加,在中度损伤时最明显。筛板前区星形胶质细胞柱消失,细胞突起增多,变粗,筛板区星形胶质细胞迁移到神经束中。HLA-DR阳性细胞轻度损伤时数量不增加,但阳性面积增大,且细胞突起变粗;中度损伤时阳性细胞数量及面积均增加,且达到最高峰;重度损伤时有所下降。有髓神经区域HLA-DR阳性细胞较无髓神经区域更明显。部分活化的小胶质细胞表达CD-68。在血管周围以及乳头旁脉络膜组织,视神经与巩膜交界处均发现较多HLA—DR阳性细胞。超微结构上可见轴突线粒体肿胀,丢失,髓鞘崩解,出现大量吞噬细胞,内含大量溶酶体及髓鞘样物质。以上结果表明在不同损伤程度的猕猴慢性高眼压模型中,星型胶质细胞和小胶质细胞均出现了不同程度的活化,且在中度损伤时达到高峰。星形胶质细胞和小胶质细胞均参与视乳头组织重建过程。其中小胶质细胞表现了吞噬功能,并且可能在血视网膜屏障的保护方面起了一定的作用。