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目的:本实验旨在深入研究古典医籍及现代中医文献的基础上,并结合前期临床研究,阐明“湿热瘀毒”是大肠癌的中医证候病机的关键,对大肠癌重新进行中医辨证分型,制定大肠癌的中医“湿热瘀毒”证型及其辨证标准,并对大肠癌“湿热瘀毒”证手术病人的肿瘤原发灶、肿瘤周边淋巴结和癌旁正常上皮组织进行相关肿瘤标志物(CEA、CA242、CA-199和CK20)的联合检测,进一步确定“湿热瘀毒”证候大肠癌相关肿瘤标志物的特殊表达,以指导临床的诊断治疗和判断预后。方法:1理论研究本研究是在深入研究古典医籍及现代中医文献的基础上,以中医病因病机理论为依据,收集、整理、提炼,结合前期临床研究,提出“湿热瘀毒”是大肠癌中医病因病机关键的科学假说,并制定以“湿热瘀毒”证候为主的大肠癌中医辨证分型。2临床研究①临床研究以大肠癌患者为研究对象,根据中医理论及结合临床,通过病人的临床症状体征等,在重新进行大肠癌中医辨证分型的基础上,制定中医“湿热瘀毒”证候大肠癌的辨证标准。②通过免疫组织化学方法分别对50例大肠癌“湿热瘀毒”证手术病人和50例正常人为对照组,对肿瘤原发灶、肿瘤周边淋巴结、癌旁正常上皮组织进行相关肿瘤标志物(CEA、CA242、CA-199)的联合检测,进一步确定肿瘤的特殊表达,肿瘤的分期,并将其与临床资料和预后相联系,指导临床及时开展术后化疗及监测。③通过免疫组织化学方法和RT-PCR方法,分别对大肠癌“湿热瘀毒”证的手术病人不同组织的CK20mRNA及蛋白表达影响的实验研究,根据其特殊表达情况,指导临床及时开展术后化疗及监测。结果:1理论研究结果首次提出“湿热瘀毒”是大肠癌的中医证候病机的关键,并阐述大肠癌形成“湿热瘀毒”证候病机的理论根据;在大肠癌辨证论治分型中首先提出“湿热瘀毒”证型。2临床研究结果(1)提出大肠癌辨证论治可分为以下四个证型:①湿热瘀毒证、②脾肾阳虚证、③肝肾阴虚证、④气血两虚证。其中以“湿热瘀毒”为主要证型,并制定中医“湿热瘀毒”证候大肠癌的辨证标准。本研究对2006年6月至2007年9月期间收治的102例大肠癌病人,进行中医辨证分型。其中属于湿热瘀毒证的有63例;属于脾肾阳虚证的有11例;属于肝肾阴虚证的有13例;属于气血两虚证的有15例。湿热瘀毒证所占比例为61.8%。(2)大肠癌“湿热瘀毒”证的手术病人不同组织CEA蛋白表达影响的实验研究:大肠癌“湿热瘀毒”证患者肿瘤原发灶的CEA相对其他各组有明显的表达,CEA对大肠癌有较高的敏感性,但缺少特异性,不能作为肿瘤的筛选指标,而是用于肿瘤患者的监测和疗效的判断。(3)大肠癌“湿热瘀毒”证的手术病人不同组织CA242蛋白表达影响的实验研究:大肠癌“湿热瘀毒”证患者,CA242在大肠癌组织中呈高度表达,而在良性组织中很少表达。而CA242在肿瘤周边淋巴结组的阳性表达,它的增高预示着肿瘤的微转移。(4)大肠癌“湿热瘀毒”证的手术病人不同组织CA19-9蛋白表达影响的实验研究:大肠癌“湿热瘀毒”证患者,CA19-9在大肠癌组织中呈高度表达,对大肠癌有较高的敏感性;而在良性组织中很少表达。研究发现平行联合检测CEA、CA242和CAl9-9可明显提高肿瘤检测的阳性率,利用它们的阳性互补性,优于任一单项肿瘤标志物。(5)大肠癌“湿热瘀毒”证的手术病人不同组织中CK20及CK20mRNA表达影响的实验研究:CK20在良性组织中很少表达,但在大肠癌组织中呈高度表达。大肠癌“湿热瘀毒”证患者,通过RT- PCR法测定大肠癌组织淋巴结中CK20mRNA表达,通过其表达程度判断微转移比传统的病理形态学更敏感,对大肠癌患者能做出准确的预后判断。结论:1研究证实“湿热瘀毒”是大肠癌的中医证候病机的关键。2制定了大肠癌的中医“湿热瘀毒”证型及其辨证标准。3阐明大肠癌“湿热瘀毒”证患者肿瘤原发灶的CEA相对其他各组有明显的表达,CEA对大肠癌有较高的敏感性,但缺少特异性。4阐明大肠癌“湿热瘀毒”证患者,CA242在大肠癌组织中呈高度表达,CA242在良性组织中很少表达。5大肠癌“湿热瘀毒”证患者,CA19-9在大肠癌组织中呈高度表达,而在良性组织中很少表达,对大肠癌有较高的敏感性。6 CK20在良性组织中很少表达,但在大肠癌组织中呈高度表达,通过RT- PCR法测定大肠癌组织淋巴结的微转移比传统的病理形态学更敏感,对大肠癌患者能做出准确的预后判断。7分析“湿热瘀毒”证大肠癌的证候病机,有助于中医临床的辨证论治。采用CEA、CA19-9、CA242、CK20四项肿瘤标志物联合检测,有助于提高肿瘤标记物诊断的敏感性和特异性,提高肿瘤的阳性诊断率,可更好的判断肿瘤的分期和预后,有助于提高对大肠癌的诊断准确性。