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目的：本研究采用siRNA技术,构建pSUPER-siCD55, pSUPER-siCD59重组载体,分别转染Jurkat细胞系,观测CD55和CD59特异性沉默对T细胞信号转导的影响,旨在探讨CD59与CD55锚固蛋白在脂筏中的协同效应。方法：构建pSUPER-siCD55 pSUPER-siCD59重组载体,利用PCR、质粒双酶切及DNA测序对其进行鉴定。阳离子脂质体法分别将pSUPER空质粒(Ⅱ组)、重组质粒pSUPER-siCD59(Ⅲ组)和pSUPER-siCD55(Ⅳ组)转染Jurkat细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆。RT-PCR方法检测未转染的Jurkat细胞(Ⅰ组)、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组细胞中CD55和CD59基因mRNA的表达。用CD59币和CD55单克隆抗体联合作用各组T细胞,MTT法(淋巴细胞转化试验)测T细胞增殖、Western Blot测Src家族酪氨酸激酶(Src PTK)磷酸化的水平、激光共聚焦显微镜检测Fluo-3/Am负载的T细胞胞浆内钙离子的变化。结果：重组载体pSUPER-siCD55、pSUPER-siCD59经PCR及限制性内切酶酶切及测序鉴定,结果表明序列正确。重组质粒pSUPER-siCD59和pSUPER-siCD55分别转染Jurkat细胞,可表达绿色荧光蛋白,经G418筛选,得到阳性细胞克隆; RT-PCR结果显示,与Ⅰ、Ⅱ组比较,Ⅲ组细胞CD59和Ⅳ组细胞CD55 mRNA的表达均被明显抑制(P<0.05)。CD59mAb和CD55mAb联合作用于T细胞,Ⅰ组细胞增殖能力,Src家族酪氨酸激酶(Src PTK)瞵酸化条带的灰度值和细胞浆内[Ca2]i均明显高于Ⅲ、Ⅳ组(P<0.05),其中Ⅱ组低于Ⅲ组(P<0.05),差异有显著性,但Ⅰ、Ⅱ组间比较(P>0.05),无明显差异。结论：重组载体pSUPER-siCD59和pSUPER-siCD55可以分别特异性沉默CD59基因和CD55基因。本研究证实在CD59和CD55共同作用下,Jurkat细胞增殖、Src磷酸化和诱导产生[Ca2]i的能力均显著增强,其中CD59的作用更为显著。由此说明CD59、CD55锚固蛋白的脂筏效应在T细胞信号转导过程中存在协同作用。该研究为GPI锚固蛋白参与T细胞活化信号转导的分子机制提供了新的思路。为T细胞白血病的基因靶向治疗开辟了一条新途径,具有重要理论意义及临床应用前景。