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目的：胃癌是我国最常见的消化系肿瘤,每年约有64万人死于胃癌,位居癌症死因的第2位,严重威胁着人们的健康和生命。但至今其癌变机制仍不清楚,因此,寻找和发现胃癌的肿瘤标志物,对胃癌的早期诊断、治疗及预后判断具有极为重要的理论和实际意义,本研究旨在通过运用双向电泳、免疫印迹及质谱分析方法来筛选和鉴定人胃癌肿瘤相关抗原,从而探索一种寻找肿瘤相关抗原比较理想的方法。方法：采集15例胃癌患者肿瘤组织及其血清,随机分为3组,利用双向凝胶电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术,分离人胃癌组织的总蛋白质;每组样品同时跑三块胶,其中一块考马斯亮染显色后作为平行胶,其余二块转膜后分别以胃癌患者自身血清和非癌人群血清作一抗进行Western blot分析,建立2DE/Western blot反应图谱；用PDQuest8.0图像分析软件对图像进行匹配分析,寻找差异反应的蛋白质点,然后与考染平行胶比对,确定相应的差异反应蛋白质点;应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)对相应的差异蛋白质点进行质谱鉴定,蛋白质数据库检索鉴定出差异反应的蛋白质即胃癌相关抗原。结果：获得分辨率较高且匹配性较好的人胃癌组织总蛋白2-DE图谱,3块胶的平均点数为789士27,平均匹配点数为684士21,平均匹配率为86.7%;转膜后的凝胶分别与胃癌患者自身血清和非癌人群血清进行免疫印迹,获得分辨率较高的Western blot反应图谱;图像分析找出19个差异反应的蛋白质点,质谱鉴定出11种蛋白质,其中上调9种为：结蛋白(DESMIN,DES),波状蛋白(VIMENTIN,VIM),微管蛋白(TUBB Tubulin, beta),热休克蛋白5(Heat Shock Protein 5,HSPA5),α肌动蛋白(ACTC1 Actin, alpha),免疫球蛋白重链恒定区γ1 (Immunoglobulin heavy chain constant regionγ1 IGHG1).磷酸甘油酸盐激酶1(Phosphoglycerate kinasel, PGK1),肌动蛋白-2(ACTA2 Actin, aortic),平滑肌蛋白22(TAGLN Transgelin,SM22-a);下调2种为：丙酮酸激酶M2亚型(pyruvate kinase M2,PKM2),(血清)白蛋白(ALB Isoform 2 of Serum)。结论：1.获得分辨率较高的人胃癌组织蛋白与胃癌患者自身血清及非癌人群血清反应的2-DE/Wesetmblot反应图谱。2.初步筛选出11个人胃癌相关抗原,为进一步筛选胃癌分子标志物奠定了坚实的基础。3.应用SERAP法对胃癌相关抗原进行初步筛选和鉴定,证实SERAP方法是寻找肿瘤相关抗原比较理想的方法。