为研究华癸中慢生根瘤菌7653R三型分泌效应蛋白对共生固氮功能的影响及互作途径，本研究利用酵母双杂交系统筛选和鉴定了与NopP互作的宿主植物紫云英靶蛋白。　　首先克隆了华癸根瘤菌7653R的一个结瘤胞外蛋白编码基因nopP，构建了诱饵载体pGBKT7-nopP-C，在确定其无自激活性和毒性后，筛选紫云英AD cDNA文库。初步筛选获得528个克隆，复筛后获得106个阳性克隆，在酵母体内进行回转验证后选择阳性克隆测序。发现其中与NopP互作的NIP43蛋白在显色反应中互作最强。Blast和蛋白功能域分析显示：NIP43含有B-Lectin、S-locus、PAN/APP、S-TKs四个蛋白超家族结构域。　　通过对nip43进行截断突变，采用酵母双杂交技术验证和半乳糖苷酶活性检测，发现NIP43与NopP互作的区域在 N端，且互作最强的结构区域为C-Pan（22-439aa）。进一步将C-pan与NopP分别构建于GST和HIS标签的蛋白表达载体上，在大肠杆菌中表达与纯化目标蛋白。利用Pull-down和Western blot技术，检测和确证了NIP43与NopP蛋白的体外相互作用。　　同时，利用同位素体外检测了NIP43蛋白S-TKs结构域的活性，结果表明NIP43-PK在体外确实具有底物磷酸化活性，但未检测到自磷酸化活性。　　最后，利用Real Time qPCR检测了接种根瘤菌后宿主植物nip43基因和根瘤菌nopP基因的表达特征。结果表明，nip43基因在紫云英根、茎、叶中及根部组织早期不同时间段呈组成型表达，但是在根瘤中未检测到信号。nopP表达量在根瘤发育过程中呈先增加后降低的特性。