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五味子是我国传统著名中药，具有滋补强健、镇静安神、止咳平喘和保肝护肝等作用。长久以来，传统中医将五味子（Schisandra chinensis(Turcz.) Baill.）和华中五味子（Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.）的干燥成熟果实作为同种药材使用，统称为“五味子”。但是，大量现代研究表明，五味子和华中五味子果实化学成分和含量均有较大差别。因此，自《中国药典》（2000年版）开始将华中五味子果实单独收载为“南五味子”。《中国药典》（2010年版）中收载的五味子和南五味子的质量标准缺乏专属性且指标单一，不能真正反映其内在质量。本文采用成分分析、中药指纹图谱技术和DNA分子标记技术对五味子和南五味子进行了较为系统的研究，为二者的评价和质量控制提供更全面、科学、有效的方法。此外，本文还研究了五味子提取物（SCEs）对H2O2诱导氧化损伤的胰岛细胞RINm5F的保护作用，初步探索其对Ⅱ型糖尿病的治疗机制。本研究获得国家科技重大专项课题-重大新药创制“中药药效物质基础及物质资源库研究关键技术”资助，主要研究内容如下：1.研究了五味子木脂素的最佳提取工艺，通过正交试验进行筛选，以五味子醇甲和总木脂素含量为指标，优选出五味子木脂素最佳提取工艺为：90%的乙醇为提取溶剂，料液比为1：15，超声提取20min，提取3次。2.对五味子木脂素类成分进行研究，经多次硅胶柱层析，从五味子中共分离得到6个木脂素类单体化合物，经1H-NMR、13C-NMR鉴定其结构并用HPLC检测其纯度。6个单体化合物分别为五味子丙素（schisandrin C）、五味子乙素（schisandrin B）、五味子甲素（deoxyshisandrin）、五味子酯甲（schisantherinA）、五味子醇乙（schisandrol B）和五味子醇甲（schisandrin）。3.建立了可同时分离检测五味子和南五味子中8种主要木脂素类成分的高效液相色谱（HPLC）方法，并用该方法对不同产地的五味子和南五味子进行分析。结果发现五味子中普遍存在五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酚、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素，其中五味子醇甲活性较强且含量最高，建议采用五味子醇甲和7种木脂素总含量双指标控制五味子质量。五味子醇甲含量不低于4.0mg/g且7种木脂素总含量不低于14.0mg/g为优级品；五味子醇甲含量不低于2.9mg/g，且7种木脂素总含量不低于8.0mg/g为合格品。发现五味子酯甲、安五脂素和五味子甲素为南五味子的主要成分，建议采用上述3种木脂素总含量为指标控制南五味子质量，3种木脂素总含量不低于8.0mg/g为合格品。4.首次采用胶束电动毛细管电泳法（MEKC）实现了五味子和南五味子中8种主要木脂素类成分的快速分离检测，本方法的特点和突出优势在于分析速度较现有方法大幅提高（本法9.0min，文献报道MEKC法18min以上，HPLC法30min以上）。用该方法对不同产地的五味子和南五味子进行分析，结果与HPLC法一致。5.建立了五味子HPLC指纹图谱，确定了10个共有峰为特征峰，并指认了其中8种成分，用所建立的方法对20批样品进行指纹图谱分析。以指纹图谱中各特征峰相对峰面积为变量，进行系统聚类分析，将20批药材分为A、B两大类，A类为五味子，B类为南五味子；进一步将A类分为两小类，其中A1类为优级品，A2类为合格品；聚类结果与本文第3章中HPLC法测定结果一致。以9批五味子优级品药材为对照，建立共有模式，采用指纹图谱软件计算相似度，规定相似度大于0.850为五味子合格品药材，大于0.950为五味子优级品药材。对20批样品进行分析，所得结果与聚类分析和HPLC法结果一致。6.建立了五味子高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱，确定了10个特征峰，并指认了其中8种成分，用所建立的方法对20批样品进行指纹图谱分析。根据聚类分析和相似度分析结果，可将20批样品分为五味子优级品、五味子合格品和南五味子，分类结果与本文第3章中HPLC法测定结果一致。7.建立了五味子红外（IR）指纹图谱，并用该方法对20批样品进行指纹图谱分析。以9批五味子推荐药材的平均光谱作为红外参考光谱（R），采用“OPUS”软件进行相似度分析。9批五味子优级品药材指纹图谱与参考图谱（R）相似度为（97.33～99.64%），6批五味子合格品药材指纹图谱与参考图谱（R）相似度为（94.86～96.63%），5批南五味子药材指纹图谱与参考图谱（R）相似度较低（83.05～90.56%）。可见红外指纹图谱可有效区分五味子和南五味子药材，还可在一定程度上反映五味子药材的品质。8.应用随机扩增DNA多态性分析（RAPD）技术对7批五味子和3批南五味子样品进行DNA指纹分析，从60条引物中筛选出5条重复性好、扩增条带多且清晰的引物。其中引物S28扩增结果多态性丰富、扩增条带特异性强，可区分五味子和南五味子。9.利用H2O2诱导氧化损伤的胰岛细胞RINm5F为模型，通过MTT法、检测细胞内和培养液中SOD活力及MDA含量来研究五味子提取物（SCEs）的抗氧化活性及其机制。1）SCEs对胰岛细胞有增殖作用，并呈剂量依赖性。2）SCEs对H2O2诱导氧化损伤的胰岛细胞有保护作用。与模型组相比，SCEs高、中剂量组细胞存活率明显增加，分别提高了63.4%和45.6%。这说明SCEs具有浓度依赖性的抗氧化保护作用，且以SCEs高剂量组效果最为明显。3）与模型组相比，SCEs高、中剂量组培养液和细胞内MDA含量明显减少（P﹤0.05），显示细胞氧化损伤程度减轻。4）与模型组相比，SCEs高、中剂量组培养液和细胞内SOD活力明显增强（P﹤0.05），说明细胞的抗氧化能力增强。