Anabaena PCC7120中异形胞发育的信号传导机制研究

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Anabaena PCC7120是一种丝状蓝细菌,在培养基中缺失化合态氮源的条件下,丝状体上分化形成异形胞执行固氮的功能。本论文主要的目的是研究异形胞发育过程中信号传导基因的功能。 Anabaena PCC7120的全基因组序列可以从CyanoBase数据库获得。基于其全基因组数据分析,发现了211个与双组份信号传导系统有关的基因,其中,有131个组氨酸激酶基因,80个反应调控子基因。根据这些基因的结构特征将它们分别分为7个亚家族和6个亚家族。分析显示,Anabaena PCC7120中有一些蛋白同时含有双组份系统和丝/苏氨酸激酶或磷酸酶的模件。其中,有一个由13个基因组成的亚家族,这个家族的蛋白既含有丝/苏氨酸激酶结构域也含有组氨酸激酶结构域。另外,还有4个基因编码的蛋白同时含有反应调控子结构域和丝/苏氨酸磷酸酶结构域。通过基因组比较分析发现,211个基因中约有35%的基因在Synechocystis PCC6803中可以找到同源基因,但其中有一个亚家族的组氨酸激酶基因和两个亚家族的反应调控子基因在Synechocystis PCC 6803中不存在任何同源基因。 本研究中共将109个基因进行了失活,其中19个基因获得了单交换突变株但未获得双交换突变株,74个获得了双交换突变株。在缺氮的条件下对双交换突变株分别进行表型观察。结果显示,有一个突变株不能分化异形胞;三个突变株可以形成异形胞,但在缺氮的条件下仍不能维持生长;4个突变株可以分化异形胞,但在缺氮条件下生长缓慢。这些基因可能在异形胞的分化或功能中发挥作用。 本研究还针对407个基因(包括信号传导有关的基因及转录因子)制备了基因芯片。利用基因芯片研究氮源缺失条件下基因表的达变化。结果显示,在缺氮培养24小时的条件下,28个基因的表达发生变化。以上结果为综合性研究异形胞的发育的分子机制提供了重要的分子生物学及遗传学的基础,便于更加深入的了解异形胞发育过程中的调控网络。
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