暹罗鳄(Crocodylus siamensis)组织细胞中抗菌活性物质的提取与效果研究

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhubajie527
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
生物源性抗菌活性物质在生物体免疫机制中发挥着重要的作用,它们的分离鉴定和功能研究也是近年来新一代抗菌剂研发的热点。鳄鱼作为爬行动物的代表,具有生命力旺盛,抗感染力强的特点。虽然科学家已经对种类繁多的爬行动物进行了生物源性抗菌活性物质的研究,但是对于鳄鱼的相关研究却鲜见报道。本文针对此研究空白,在提取得到暹罗鳄外周血、肠道、肝脏、脾脏和肾脏组织细胞抗菌活性物质的基础上,对组织细胞提取物的体外抗菌活性以及外周血白细胞提取物在小鼠体内抗海豚链球菌感染的效果进行了初步探讨,进而研究了外周血白细胞提取物的部分理化特性。本论文包括4个部分:1、暹罗鳄组织细胞抗菌活性物质的提取及组织分布本实验采用改良乙酸提取法、硫酸铵提取法及丙酮甲醛混合液提取法分别从成年暹罗鳄的外周血、肠道、肝脏、脾脏和肾脏组织中提取抗菌活性物质,初步对比了3种提取方法的提取效率以及抗菌活性物质的组织分布。结果显示:①改良乙酸法从暹罗鳄各组织细胞中提取的物质的其抗菌作用要强于(或等于)硫酸铵提取法;而丙酮甲醛混合液法没有提取到相应的抗菌活性物质。其中,改良乙酸法提取外周血得到抗菌活性物质的效率最高,在提取物蛋白浓度为0.265g/mL时抑菌圈直径能达到9.1mm。②肠道、外周血和肝脏提取物的抗菌效果明显,而脾脏和肾脏组织的提取物未表现出抗菌活性。由此可见,抗菌物质在肠道、外周血以及肝脏组织中含量较多,在脾脏和肾脏中没有抗菌成分或者含量较少。2、暹罗鳄外周血白细胞提取物的体外抗菌效果本实验用改良乙酸法提取成年暹罗鳄外周血白细胞的抗菌活性物质,测定其对10种细菌的体外抗菌活性。结果表明暹罗鳄外周血白细胞提取物对埃希氏大肠杆菌(Eschenrichia coli)、海豚链球菌(Streptococcus iniae)、多杀性巴斯德菌(Pasteurella pneumotropica)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、金黄色葡萄球菌(StaPHylococcus aureus)、嗜水气单胞菌(AeromonashydroPHila)、副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)等10种细菌均有一定的抗菌效力:其中,对海豚链球菌的抗菌效力最强,抑菌圈达22.1 mm;对大肠杆菌的抗菌效力次之,抑菌圈达21.7mm;对霍乱弧菌的抗菌效力较弱,抑菌圈为7mm。此外,还比较了暹罗鳄外周血白细胞和密西西比红耳龟、花田鸡外周血白细胞提取物的抗菌效力的强弱,发现前者对于实验所用10种细菌的抗菌效力明显强于后两者;其中,对链球菌的抗菌效力,暹罗鳄外周血白细胞提取物最强,抑菌圈达21.3mm,密西西比红耳龟外周血白细胞提取物次之,抑菌圈为5.3 mm,花田鸡白细胞提取物最弱,抑菌圈为0.67mm。3、暹罗鳄外周血白细胞提取物抗海豚链球菌感染效果本实验通过改良乙酸提取法从成年暹罗鳄外局血白细胞中获得提取物,并将此提取物以3种不同的方式注射小鼠,测定其在小鼠体内抗御海豚链球菌感染的效果。实验结果表明,海豚链球菌以腹腔注射感染小鼠,小鼠表现出明显病理症状,用不同浓度(2.2×10~3、2.2×10~2、2.2×10~1μg/mL)的提取物腹腔注射小鼠,可使小鼠分别获得77.8%、55.6%、44.4%的相对保护率;海豚链球菌与不同浓度(2.2×10~3、2.2×10~2、2.2×10~1μg/mL)的提取物在体外等体积混合,将此混合物腹腔注射小鼠,可使小鼠分别获得55.6%、88.9%、77.8%的相对保护率;海豚链球菌以肌肉注射小鼠左腿,同时以不同浓度(2.2×10~3、2.2×10~2、2.2×10~1μg/mL)的提取物以肌肉注射小鼠右腿,可使小鼠分别获得77.8%、66.7%、44.4%的相对保护率。4、暹罗鳄外周血白细胞提取物的理化性质本实验研究了成年暹罗鳄外周血白细胞提取物的部分理化性质及抗菌动力学。理化因子研究表明,抗菌成分对热稳定、对EDTA敏感、对氯仿稳定;动力学研究表明:暹罗鳄外周血白细胞提取物抗菌作用迅速,在其与大肠杆菌作用3 min内,即表现出明显的抗菌效力(差异极显著)。其中提取物与大肠杆菌作用0 min和1 min时,抗菌效果并没有表现出统计学差异(差异不显著),但作用2 min后,差异极显著。
其他文献
目的:观察应用导管塑型技术在复杂冠脉介入诊疗中的效果,并总结本中心导管塑型经验、导管塑型原因分布。材料与方法:本研究分为两部分,第一部分采用单中心、随机、单盲、平行
改革开放以来,饭店业与旅游教育同步增长,但人才供需不对称,为解决这个问题,本文从校企合作的必要性研究入手,站在饭店业的立场上,研究饭店业校企合作的内容,探讨合作的模式,
研究目的:为描述高速铁路结构设计中路基和地基的整体结构性能,提出并解释了路基面支承刚度概念,并对其工程意义及设计检测方法进行探讨。研究结论:路基面支承刚度是无砟轨道
目的:观察清热利湿法治疗糖尿病尿路感染的疗效。方法:将50例糖尿病尿路感染患者随机分为2组。对照组25例,常规治疗基础上给予三金片口服治疗;治疗组25例,在常规治疗的基础上
魅力是在未来社会竞争中立于不败之地的宝贵才能,在英语教学中,教师一是应树立正确的魅力观念;二是用自身的魅力潜移默化地对学生施以影响;三是挖掘教材中的魅力渗透要素,使学生在
在中温条件下,研究生物填料厌氧消化处理工艺(包括未加搅拌和添加搅拌两种工艺)相对于传统厌氧消化工艺对处理污水处理厂剩余污泥的改善作用。结果表明:生物填料厌氧消化罐在6%,
学生作为一个个体,每个人都有自己的个性,表现出来的行为特征有很大不同。如何让心理健康教育发挥其特有的育人功能,使一朵朵纯真的花儿在心育之泉浇灌下健康成长呢?一要了解学生
目的:观察应用微创经皮肾镜钬激光碎石术(MPCNL)治疗输尿管上段结石的临床疗效。方法:选取2012年1月至2013年1月间我院收治的输尿管上段结石患者100例作为研究对象,应用微创
如今零售企业面临着诸多问题,品牌同质化、品牌竞争加剧成为必然趋势,企业生存面临着挑战。在现实生活中,由此引发的各种法律问题也层出不穷。面对这种情况,研究连锁零售企业
随着机器视觉技术的高速发展,自动驾驶、视频监控和机器人自主导航等智能应用越来越多地依赖于精准有效的行人运动分析结果,行人运动分析、行人行为理解逐渐成为了研究热点。