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由革兰氏阴性菌黄单胞菌水稻变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起的水稻白叶枯病(Bacterial Blight,BB)是水稻中最严重的细菌病害之一,而利用抗白叶枯病基因培育水稻抗病新品种,是防治该病害最为有效的方法。水稻Xa7基因是一个持久的、广谱的显性抗白叶枯病基因,在水稻抗白叶枯病研究和应用中具有十分积极的作用。水稻Os TET3(GenBank accession: Os03g0853200)是Xa7抗病应答中受白叶枯病诱导表达的基因,编码含有四次跨膜结构域的Tetraspanins超家族蛋白成员,目前功能未知。 为了探究水稻OsTET3基因的功能及其抗病机理,本文利用农杆菌介导的水稻转基因法,将OsTET3基因过表达载体转化到感病水稻品种中花11的愈伤组织中,成功获得16个转基因株系,其中7个T1代株系经筛选、鉴定后,在白天30℃、12h光照/晚上28℃、12h黑暗的培养箱中,对五叶期的植株进行了白叶枯病菌抗性鉴定。与野生型水稻中花11相比,个别OsTET3过表达转基因株系对白叶枯病菌的抗性有所提高,但还需要后期移栽大田,进行自然环境下的抗病性鉴定。同时,利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻中花11的OsTET3基因,获得2株成功地敲除的纯合转基因突变体。构建了Os TET3 promoter∷GUS表达载体,利用农杆菌介导法将其转入水稻中花11的愈伤组织中,并对获得的6株阳性转基因苗进行GUS活性鉴定,发现OsTET3基因主要在根部表达,在叶上有少量表达,在茎和小穗中几乎没有表达;利用农杆菌侵染烟草的方法,将35Spromoter∷OsTET3:eGFP载体转入烟草细胞中瞬时表达,对OsTET3进行亚细胞定位,发现在细胞膜和细胞质中都表达。这些研究结果,从不同角度分析了OsTET3基因的功能,为该基因的抗病分子机理研究奠定了坚实的基础。