链球菌蛋白G（Streptococcal Protein G,SPG）分子C末端具有IgG抗体结合活性；纤维结合结构域（Cellulose Binding Domain,CBD）是纤维素酶的重要组成部分，不具有降解纤维素功能，但能够通过自身的楔形结构，吸附于纤维素链状分子表面。本课题试图将SPG基因重组于CBD基因3’末端，并通过原核表达获得一种兼具IgG结合和纤维素吸附的双功能融合蛋白，为制备新型IgG亲和层析材料提供一种新的工具蛋白。 本研究利用基因重组技术将嗜纤维梭菌（Clostridium cellulovorans）的纤维素结合域编码基因CBDclos与绿色木霉（Trichodermaviride）纤维素结合域编码基因CBDtri分别插入出发质粒pET28a-SPG中，获得表达质粒pET28a-CBDclos-SPG与pET28a-CBDtri-SPG。质粒验证无误后，经热激法转化大肠杆菌BL21（DE3）。用含有卡那霉素的LB固体培养基筛选阳性重组子，并且在卡那霉素选择压力下能够稳定传代。用LB液体培养基培养工程菌，生长至OD600为1时，以IPTG为诱导剂，30℃条件下诱导目的基因表达，获得融合蛋白CBDclos-SPG、CBDtri-CBD，分子量分别为40kDa、30kDa。对表达产物两部分结构的功能进行鉴定，并选用纤维素Sigmacell50装柱，对目的蛋白进行分离纯化。获得纯品后，对蛋白与不同材料和IgG的结合能力进行测定。结果显示不同多糖材料对CBDclos-SPG的载量明显高于CBDtri-CBD，其中纤维素Avicelph101对CBDclos-SPG的载量可达11.61mg/g，Avicel ph101-CBDclos-SPG对兔IgG的载量可达25.73mg/g。 此外，本研究还对CBDclos-SPG进行应用探索，将蛋白吸附于纤维素表面，形成纤维素-CBDclos-SPG复合物，进行兔血清中IgG的分离纯化和样品中抗原的捕获进行探索。实验结果表明，CBDclos-SPG可结合于纤维素表面，作为配基纯化兔血清中的IgG，也可以与HSA抗体结合，进而捕获生物样品中的融合蛋白IFNβ-HSA。 本课题通过分子设计、构建、表达等步骤获得双功能蛋白CBD-SPG(CBDclos-SPG、CBDtri-CBD)。实验表明，CBD-SPG即具有纤维吸附能力，又具备IgG Fc端结合能力，为免疫学分析提供了一种新型工具蛋白，同时也有望成为一种新型亲和层析材料，可用于IgG分离纯化方面。