论文部分内容阅读
XopP和XopQ为水稻黄单胞菌Ⅲ型泌出系统分泌的两个效应因子，XopP和XopQ在大部分黄单胞菌（Xanthomonasspp.）中高度保守。XopQxoo与Pseudomonassyringaepv.tomato中的HopQ1以及Xanthomonasoryzaepv.oryzicola中的XopQ1xo同源。HopQ1能增强病原菌的毒性并依赖于磷酸化与番茄14-3-3蛋白互作。XopQ1xoc通过抑制寄主免疫系统中未知的靶标蛋白增强病菌在水稻上的毒力。利用AvrBs2作报告标签，有研究表明XopP可向植物中泌出，但功能未知。本实验利用同源双交换的方法进行基因敲除并对目的基因进行回补，研究水稻黄单胞菌水稻致病变种（Xanthomonasoryzaepv.oryzae，Xoo）菲律宾菌株PXO99A的中XopP、XopQ对致病专化性的影响。结果表明，XopP、XopQ缺失后，黄单胞菌Xoo在NA培养基中生长速度减慢，在非寄主烟草上HR反应明显减弱，虽然在水稻品种IR24上致病力与野生型没有显著差异，但是各自均在几个不同水稻品种上与野生型致病力差异明显。 植物病原细菌Xoo分泌的Harpin蛋白可激活植物防卫反应信号通路，包括胞外过氧化氢信号转导。然而，在这个通路中，Harpin的识别方式以及胞外过氧化氢在防卫反应中的作用还不是很清楚。Hpa1是水稻白叶枯病菌产生的蛋白，本实验检测了Hpa1xoo的细胞定位是否影响拟南芥过氧化氢的产生以及对病原菌的抗性。通过转化hpa1xoo以及融合胞外泌出信号的hpa1xoo（shpa1xoo）分别产生转基因拟南芥HETAt和SHETAt(h(hpa1xoo。-andshpa1xoo-expressingtransgenicA.thaliana)。Hpa1xoo在SHETAt植株中定位于胞外但是在HETAt植株中定位于胞质。此外，Hpa1xoo在SHETAt植株中的定位伴随着胞内胞外过氧化氢的积累，但是在HETAt植株中只在胞质积累。胞外过氧化氢的产生依赖于膜定位的烟碱酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)，这在植物中是常见特征。SHETAt植株中过氧化氢积累于胞外依赖于NOX，但是更多积累于胞质。两种植株中，若对胞外过氧化氢的产生进行抑制，则胞内过氧化氢的产生消失，植物对病原菌的抗性减弱。这些结果表明，胞外过氧化氢可能参与胞质转运以在植物防卫反应中起作用。