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粮食经常会发现有真菌毒素的存在，并且不同类型毒素会共同存在，而其共存后对人体的联合毒性并没有系统的认识，国家对于毒素共存后单种毒素的最大允许摄入量也没有明确的法律法规。本文选取较有代表性的真菌毒素—黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1,AFB1）和杂色曲霉素（Sterigmatocystin，ST）进行联合毒性的研究，鉴于两种毒素都具有肝毒性，本试验选取HepG2细胞作为研究对象。经过AFB1和ST的单独和联合作用后，观察HepG2细胞的细胞内部各部位的损伤情况，细胞凋亡的程度以及凋亡相关的蛋白表达的变化。探讨AFB1和ST的单独和联合作用诱导HepG2细胞凋亡的作用机制以及二者的联合作用类型。将不同浓度的AFB1、ST以及其混合物加入处于对数期的HepG2细胞中进行处理，并且设置溶剂对照组（0.1%DMSO）。药物处理24h、48h后，观察细胞中细胞增殖率、ATP含量、DNA含量、线粒体膜通透性及活性氧含量5个指标的变化情况，并且分析两种毒素的联合作用。结果发现单独及联合作用时细胞的存活率、细胞的DNA含量、ATP含量的降低程度呈剂量相关性，而细胞内ROS的含量、线粒体膜通透性呈剂量依赖性增高。对各个指标的结果进行显著性分析表明，当AFB1和ST联合作用于HepG2细胞时表现为加和作用。选取AFB1、ST单独及联合染毒时对细胞增殖抑制率达到10%、30%和50%时的浓度为本章的实验浓度，并设置溶剂对照组（0.1%DMSO），药物处理48h后，观察细胞的形态变化，检测细胞线粒体膜电位的变化，细胞周期的变化以及细胞凋亡率。实验发现Hoechst33258染色后细胞出现浓染，表明有细胞凋亡的现象产生。AFB1、ST及其混合物都诱导HepG2细胞发生了细胞周期阻滞。单独作用时不同浓度的药物会诱导不同的周期阻滞，主要集中在G0/G1期和S期，联合作用时则同时诱导HepG2细胞发生G0/G1期阻滞和S期阻滞。同时，线粒体膜电位的下降及细胞凋亡率的增加均呈剂量相关性。两种毒素联合染毒后，细胞凋亡各个表征并没有比单独作用时明显增多或者减少，进一步证明两种毒素的联合作用为加和作用。采用细胞免疫组织化学染色检测AFB1、ST单独及联合作用时对HepG2细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及p53表达的影响。结果表明Bcl-2蛋白的阳性表达量呈剂量依赖性降低，Bax、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及p53的阳性表达量随着毒素浓度的增加而增加。上述实验表明AFB1、ST单独及联合作用会对HepG2细胞的主要部位如DNA和线粒体造成损伤，并且引起细胞凋亡。综上所述，AFB1和ST联合作用于HepG2细胞时为加和作用。