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目的:本研究利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)抑制卵巢癌SKOV3细胞DJ-1的表达,探讨DJ-1对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭等生物学特性的影响。方法:1.设计并合成3对针对DJ-1的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),采用阳离子脂质体法瞬间转染SKOV3细胞。实验分组:①正常对照组;②阴性对照组;③siRNA-DJ-1-a组;④siRNA-DJ-1-b组;⑤siRNA-DJ-1-c组。2.通过蛋白印迹法(Western Blot)检测各组细胞中DJ-1蛋白的表达,筛选出干扰效果最佳的序列。3.分别采用MTT比色法、流式细胞术和Transwell侵袭实验检测DJ-1对SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果:1.Western blot检测siRNA对DJ-1蛋白表达的影响,结果显示:转染后48h,正常对照组与阴性对照组相比,DJ-1蛋白表达差异无统计学意义(0.51±0.02 vs0.50±0.02,P>0.05)。而siRNA-DJ-1-a组、siRNA-DJ-1-b组、siRNA-DJ-1-c组均显著低于其它对照组,差异有统计学意义(0.07±0.01、0.11±0.02、0.10±0.01 vs0.51±0.02、0.50±0.02,P<0.05),其中siRNA-DJ-1-a组较其它两组抑制效果更明显,差异有统计学意义(0.07±0.01 vs 0.11±0.02,0.07±0.01 vs 0.10±0.01,P<0.05)。2.MTT比色法检测si RNA-DJ-1-a对SKOV3细胞增殖的影响,结果显示:si RNA-DJ-1转染后12h,正常对照组、阴性对照组、siRNA-DJ-1-a组细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05),而siRNA-DJ-1转染后24h、48h和72h,si RNA-DJ-1-a组细胞增殖率明显低于正常对照组(24h,0.379±0.044 vs0.492±0.035;48h,0.486±0.059 vs 1.127±0.078;72h,0.738±0.046 vs 1.373±0.055)和阴性对照组(24h,0.379±0.044 vs 0.460±0.057;48h,0.486±0.059 vs 1.043±0.080;72h,0.738±0.046 vs 1.350±0.067),差异有统计学意义(P<0.05)。3.流式细胞术检测siRNA-DJ-1-a对SKOV3细胞凋亡的影响,结果显示:si RNA-DJ-1转染后24h,正常对照组与阴性对照组的早期凋亡率相比,差异无统计学意义(1.77±0.71%vs 2.83±0.55%,P>0.05),而siRNA-DJ-1-a组的早期凋亡率明显高于正常对照组(27.97±9.86%vs 1.77±0.71%)和阴性对照组(27.97±9.86%vs 2.83±0.55%),差异有统计学意义(P<0.05)。4.Transwell侵袭实验检测siRNA-DJ-1-a对SKOV3细胞侵袭的影响,结果显示:siRNA-DJ-1转染后48h,正常对照组与阴性对照组穿膜细胞数相比,差异无统计学意义(60.83±2.04 vs 58.83±1.47,P>0.05),siRNA-DJ-1-a组的穿膜细胞数明显少于正常对照组(27.67±1.86 vs 60.83±2.04)和阴性对照组(27.67±1.86vs 58.83±1.47),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:si RNA下调DJ-1基因表达可抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡。