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目的:实验性视网膜脱离后,应用caspase酶抑制剂z-VAD-FMK虽然可以抑制细胞凋亡,但增加RIP-1介导的坏死性凋亡。本实验探讨实验性视网膜脱离后,雷帕霉素干预的自噬激活能否抑制坏死性凋亡以及雷帕霉素联合z-VAD-FMK对视网膜是否具有保护作用。方法:健康雄性SD大鼠随机分为无网脱组(Attached)、网脱组(Untreated)、zVAD-FMK组,z-VAD-FMK+雷帕霉素(RAPA)组。通过视网膜下注入透明质酸钠和DMSO构建网脱模型。z-VAD-FMK及雷帕霉素在构建网脱模型的同时于网膜下注射。利用蛋白质免疫印迹法(western blot)测出RIP-1、beclin-1、LC3、AIF蛋白表达情况,通过D02 ROS探针的荧光强度检测各组内视网膜活性氧(ROS)表达情况,苏木素—伊红(HE)染色及电子显微镜观察视网膜厚度及光感受器细胞死亡情况,改良水迷宫实验测试干预后的大鼠行为学改变。结果:成功构建视网膜脱离模型,z-VAD-FMK+RAPA组beclin-1、LC3表达增加,自噬激活。电子显微镜结果显示z-VAD-FMK+RAPA组光感受器细胞的坏死较untreated组和z-VAD-FMK组明显减少。借助HE染色,观察视网膜外核层厚度,结果显示z-VAD-FMK+RAPA可以减少网脱后视网膜的损伤,与untreated组和z-vad-fmk组相比,视网膜外核层标准厚度比增加。Western blot结果显示,雷帕霉素诱导自噬激活后,RIP-1表达下降,坏死性凋亡被抑制,与此同时,自噬激活也抑制ROS以及AIF的释放。最后,通过改良后的水迷宫测试大鼠视行为学,数据显示雷帕霉素处理后的大鼠找到平台的时间也明显减少,差异有明显的统计学意义。结论:实验性视网膜脱离后,雷帕霉素干预激活自噬,自噬激活通过抑制ROS的释放,改善线粒体通透性,抑制凋亡诱导因子AIF的释放,进而抑制坏死性凋亡。雷帕霉素与z-VAD-FMK联合最大程度的减少光感受器细胞的死亡,对视网膜起到一定程度的保护作用。