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目的:探讨苦瓜提取物(BME)在脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞系RAW264.7中的抗炎作用,并且揭示BME在抑制巨噬细胞炎症反应中的机制。 方法:培养鼠源的巨噬细胞系RAW264.7,检测不同浓度BME对该细胞的毒性作用,选最适浓度的BME预处理,再用LPS刺激实验细胞,用Real-time PCR和Western blot法检测TNF-α、COX-2和iNOS的mRNA和蛋白表达的影响。用ELISA法检测细胞分泌液中TNF-α和PGE2,用Griess reaction法检测NO的产生。BME抑制TNF-α、PGE2和iNOS产生的机制用Western blot法检测核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65的磷酸化情况。用脂质体2000将NF-κBp65 siRNA和对照siRNA转染巨噬细胞系RAW264.7,Western blot法检测p65的表达及Real-time PCR法检测TNF-α、COX-2和iNOS的表达,同时用NF-κBp65的抑制剂做同样检测。 结果:BME明显抑制LPS刺激的巨噬细胞系RAW264.7产生的TNF-α、PGE2和NO,p<0.05,有统计学意义。通过抑制NF-κBp65通路BME抑制TNF-α、COX-2和iNOS的产生,使用NF-κ Bp65 siRNA和抑制剂后可以降低LPS刺激的TNF-α、COX-2和iNOS的产生。结论:BME有在RAW264.7中抑制LPS诱导的炎症相关因子产生的作用,并且这种抑制作用是通过抑制NF-κBp65通路来实现,有潜在的缓解巨噬细胞炎症反应的作用。