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目的:世界各地头颈癌患者的HPV感染率都不尽相同,而且到目前为止仍然没有针对内蒙古通辽地区的头颈癌患者的HPV感染率的数据。内蒙古通辽地区的蒙古族聚居率高达46%,而且是我国宫颈癌高发地区;宫颈癌的发生与高危型HPV的感染有着密切的关系,因此,该地区也是HPV的高度流行地区。有不少研究证实高危型HPV的感染也和头颈部鳞状细胞癌的发生有着密切的关系,所以,我们推测该地区的头颈癌可能和该地区的高度流行的HPV有关。本研究选取了内蒙古通辽地区来做针对头颈癌中HPV感染率和感染型别的流行病学调查,初步了解通辽地区的头颈癌患者的HPV感染率,以及相应的HPV的分型。一方面,可以填补这一数据空白,另一方面,也可以为我国头颈癌防治策略的制定提供一定的依据。方法:1.根据内蒙古通辽市的内蒙古民族大学附属医院和科尔沁第一人民医院的病理档案,时间从近到远,初步筛选在2009年10月到2012年12月期间被诊断为头颈癌病例。2.对石蜡包埋的癌组织样品按顺序进行包括:波片a(HE前)、备份白片(HE)、PCR片、PCR备份片、和波片b(HE后)切片。3.对HE片进行病理诊断,将最终诊断结果录入统一的CRF表中。4.利用蛋白酶K处理石蜡切片(PCR片)提取样品基因组,提取的基因组经过β-globin球蛋白引物(上游5’-GAAGAGCCAAGGACAGGTAC下游5’-CAACTTCATCCACGTTCACC) PCR扩增。5.采用普式引物PCR检测法和HPV E6基因型特异性引物筛查法,对样本进行HPV PCR检测。6.对基因提取未成功的样本使用DNA纯化试剂盒进行提取。7.对HPV检测呈阳性的样品进行测序分析。鉴定亚型和E6致癌基因突变情况。8.对三明治切片中的备份白片进行p16INK4a的免疫组织化学染色。以宫颈癌有高P16表达的样本作为阳性对照,观察本研究的样品中P16的阳性表达。结果:1.本研究一共从当地医院收集到137例头颈癌的病例及相关对照组织样品。2.通过两位病理医师的病理诊断,我们得出了137例样本的准确的诊断结果:确切头颈鳞癌47例,其他癌7例,非典型增生8例,乳头瘤50例,息肉25例。3.137例样本中HPV检测呈阳性的样本共7例,54例头颈癌样本中HPV检测呈阳性的样本共4例,47例确切鳞癌样本中HPV检测呈阳性的样本共3例。4.HPV型别的测序结果:HPV58, HPV31, HPV81, HPV6, HPV11各一例,HPV16两例;其中一例HPV58和两例HPV16为鳞癌样品。5.47例确切的头颈鳞癌组织切片样本的p16INK4a阳性率为10.6%,7例的其他癌组织切片样本的p16INK4a阳性率为42.9%。本研究的所有头颈癌的p16INK4a阳性率为16.7%。结论:1.该地区头颈癌的HPV阳性率为7.4%,头颈鳞癌的HPV阳性率为6.4%。该地区头颈癌中HPV整体感染率较低,与上海地区一个研究的3.5%的HPV阳性率接近,低于北京地区两个研究的27.4%和17.2%的HPV阳性率[78,79,80]。进一步证明了我国不同地区头颈癌中HPV感染率的不均一性。2.该地区头颈癌及相关组织中检测出的HPV的型别:58型,16型,81型,6型,11型,31型;与该地区的头颈鳞癌相关的型别分别为:58型,16型。