龙蛭汤对大鼠脑梗死模型梗死灶周围组织VEGF及Flk-1 mRNA表达的影响

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目的:研究龙蛭汤(自拟方)对脑梗死大鼠梗死灶周围组织血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)及其受体(FetalLiverKinase1,Flk-1)mRNA表达的调节作用,并基于VEGF和Flk-1基因初步探讨龙蛭汤对脑梗死神经功能康复作用的机制,为该方的临床应用提供实验依据。方法:选200只清洁级成年SD雄性大鼠,均采用线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型,参照ZeaLonga5级评分标准,筛选出120只评分为1~3分的脑缺血SD大鼠,作为造模成功的实验对象,把它们随机分实验组、对照组和模型组,每组40只。于手术后2h起每天分两次灌胃给药,实验组给予龙蛭汤药液,对照组给予补阳还五汤药液,模型组给予无菌水。三组分别在给药后第3天、7天、14天、28天时随机处死10只大鼠,开颅取脑梗死灶周围组织。应用定量反转录-聚合酶链反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR)技术检测组织中VEGF及其受体Flk-1mRNA的表达情况。结果:1.RT-PCR检测结果显示:与模型组比较,两个用药组在各时间点VEGF及Flk-1mRNA的表达升高,尤以实验组明显(P均<0.05);2.观测三组大鼠VEGFmRNA表达量的动态变化显示,各组从第3天开始表达量均呈逐渐下降的趋势,实验组3d-7dVEGF表达量下降的速率略快于对照组和模型组(斜率a,-0.26<-0.17=-0.17),而7d-14d以及14d-28d的下降速率较对照组和模型组下降减缓(斜率a,-0.13>-0.14>-0.18;-0.1>-0.17>-0.11)。3.三组大鼠Flk-1mRNA的表达量变化显示,3-7天时表达量出现暂时升高,7天后开始均呈逐渐下降的趋势(斜率a,0.17>0.13=0.13)。实验组3d-7dFlk-1mRNA表达量上升的速率略快于对照组和模型组,而7d-14d以及14d-28d的下降速率较对照组和模型组下降减缓(斜率a,-0.11>-0.12>-0.13;-0.21>-0.26>-0.37)。4.经相关性分析,三组VEGF、FLK-1mRNA的表达量随治疗时间推移与时间均具有一定相关性,而且实验组VEGF、Flk-1mRNA的表达量与时间的相关性均高于对照组和模型组(相关系数r,0.718>0.578>0.562;0.617>0.536>0.529)。结论:龙蛭汤对大鼠脑梗死模型具有促进其神经功能康复的作用,其机制可能与调控梗死灶周围组织中组织VEGF及Flk-1基因的表达有关。龙蛭汤增加VEGF及Flk-1基因的表达量,减慢表达能力的衰退,对神经系统具有多重保护作用,促进血管形成、神经发生、营养神经和神经保护及抗凋亡等多种途径发挥作用。
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