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目的:1.观察电针不同腧穴组对硝酸甘油(GTN)诱导的偏头痛模型大鼠的行为学影响,比较不同腧穴配伍的效应差异。2.选择与疼痛关系密切的MAPK通路、ADORA1为切入点,观察电针及侧脑室微量注射腺苷A1受体激动剂(CCPA)和拮抗剂(DPCPX)对硝酸甘油(GTN)诱导的偏头痛模型大鼠的镇痛作用。研究ADORA1以及MAPK通路中ERK1/2在偏头痛发病中的可能作用及机制。同时以ERK1/2、ADORA1的基因和蛋白表达为指标,揭示电针镇痛的作用机制,为电针对偏头痛镇痛作用机制的阐明提供科学实验基础。方法:1.通过建立硝酸甘油实验性偏头痛大鼠模型,观察各组大鼠的行为学变化。然后观察电针局部经穴组(风池、率谷)、循经远取组(外关、阳陵泉)以及局部加远取组(风池、阳陵泉)对本模型大鼠偏头痛症状的影响,并比较各组差异。2.应用免疫组化、实时荧光定量PCR等研究方法,初步探讨电针局部经穴组(风池、率谷)及侧脑室微量注射ADORA1激动剂CCPA、ADORA1拮抗剂DPCPX对偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓部位ADORA1m RNA表达的影响;应用Western Blot、实时荧光定量PCR等研究方法,观察电针局部经穴组(风池、率谷)对偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓部位MAPK通路中ERK1、ERK2蛋白及基因表达的影响。结果:1.行为学观察结果显示:“爬笼、挠头、耳红”等行为学改变可以看作是大鼠对疼痛防御反应的客观表现,可以作为硝酸甘油(GTN)型偏头痛大鼠模型行为学评价的指标。电针循经远取组(外关、阳陵泉)、局部经穴组(风池、率谷)以及局部加远取组(风池、阳陵泉)均能够降低偏头痛模型大鼠的行为学评分,电针局部经穴组在降低偏头痛大鼠的行为学评分方面优于电针循经远取组及局部加远取组。2.RT-PCR结果显示:(1)偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓ADORA1m RNA表达下调,电针局部经穴组(风池、率谷)可上调其基因表达。ADORA1激动剂CCPA侧脑室微量注射后可上调其ADORA1m RNA表达,且与电针局部经穴组(风池、率谷)配合后可进一步上调其ADORA1m RNA表达;ADORA1拮抗剂DPCPX侧脑室微量注射后则抑制其表达,且与电针局部经穴组(风池、率谷)配合后可进一步抑制其ADORA1m RNA表达。(2)偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓ERK1m RNA及ERK2m RNA表达上调,电针可下调其基因表达。3.免疫组化结果显示:偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓ADORA1(表达部位为细胞浆)的蛋白表达下调,电针可上调该受体表达。ADORA1激动剂CCPA侧脑室微量注射后可上调其蛋白表达,且可能与电针具有同向的协调作用。ADORA1拮抗剂DPCPX侧脑室微量注射后则抑制其表达,并可能对电针产生反向的抑制作用。4.Western Blot结果显示:偏头痛模型大鼠下丘脑和脊髓ERK1及ERK2蛋白表达上调,电针可下调二者蛋白表达。结论:1.电针循经远取组(外关、阳陵泉)、局部经穴组(风池、率谷)及局部加远取组(风池、阳陵泉)均能够明显降低硝酸甘油(GTN)型偏头痛大鼠的不适行为学评分;其中局部经穴组(风池、率谷)作用更明显。2.硝酸甘油(GTN)型偏头痛的发生发展与大鼠下丘脑和脊髓ADORA1的表达下调、ERK1/2的表达上调有关。3.电针能够上调偏头痛大鼠下丘脑和脊髓ADORA1的表达,下调其ERK1/2的表达。