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目的:探讨Rb和p27在婴幼儿皮肤血管瘤自然退化过程的可能作用及机制,为临床寻找血管瘤的治疗新方法提供理论指导。
方法:本实验收集有完整临床和病理资料的49例皮肤血管瘤手术切除标本,常规HE染色和免疫组织化学SABC法检测增殖细胞核抗原(PCNA,proliferatingcellnuclearantigen),按Mulliken分类标准并结合PCNA的表达进行分期;然后采用免疫组织化学方法(SABC法)检测49例人皮肤血管瘤增生期、退化期及5例正常皮肤组织中Rb和p27的表达水平,并结合第Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达Rb和p27的细胞是血管内皮细胞;对所获得的检测结果应用Image-ProPlus分析软件进行图像分析,并分析组织化学反应阳性颗粒的积分光密度和面积。
结果:1.血管瘤分期结果:手术切除血管瘤标本49例中,处于增生期的有26例,处于退化期的有23例。2.p27蛋白的表达:p27蛋白阳性表达定位于血管瘤内皮细胞的胞核或胞浆,呈棕黄色或棕褐色颗粒,正常的血管内皮细胞也有大量表达。在增生期组、退化期组和正常皮肤组p27表达的积分光密度和面积分别为42.01±14.85、60.52±18.60和121.67±24.09;104.69±32.88、170.42±46.50和315.73±63.61。增生期组与退化期组、正常皮肤组以及退化期组与正常皮肤组分别相比,p27蛋白阳性表达的差异均有显著性意义(P<0.05)。3.Rb蛋白的表达:阳性物质主要定位于血管内皮细胞膜,部分胞浆着色,呈棕黄色或棕褐色颗粒,在增生期组、退化期组和正常皮肤组Rb表达的积分光密度和面积分别为281.224±71.83、411.004±81.83和140.70±30.79;273.30±84.34.、656.38±208.33和168.73±48.13。增生期组与退化期组、正常皮肤组以及退化期组与正常皮肤组分别相比,Rb蛋白阳性表达的差异均有显著性意义(P<0.05)。4.PCNA阳性表达的细胞在光镜下可见核内弥漫分布细小的棕黄色颗粒。在增生期组、退化期组PCNA表达的积分光密度和面积分别为322.48±119.32和131.95±45.06;654.45±140.95和229.27±76.64。增生期组与退化期组相比,PCNA蛋白阳性表达的差异均有显著性意义(P<0.05)。
结论:(1)血管瘤是以内皮细胞增生为生物学特征。PCNA可作为血管瘤分类和分期的客观标志物。PCNA的检测也为血管瘤临床治疗效果的比较和研究提供了较为客观的指标。(2)p27可能通过抑制血管形成和血管内皮细胞增殖来抑制血管瘤的发展。(3)Rb和p27在血管瘤的发生、发展中可能起着相互调节和抑制的作用。