甲基莲心碱对有机磷酸酯抑制的胆碱酯酶的重活化作用及其分子机制

来源 :华中科技大学同济医学院 华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ayczswh
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该研究在观察甲基莲心碱(Neferine,Nef)保护有机磷酸酯中毒小鼠作用的基础上,研究Nef重活化中毒酶的效应,依托有机磷酸酯分子毒理学理论,探讨Nef复活ChE作用的分子机制,已完成的研究工作包括以下五个方面:(1)采用急性毒性试验及DTNB比色法测定小鼠ChE活力单位,对敌敌畏(DDVP)或敌百虫(Dip)中毒小鼠组及Nef、阿托品和氯磷定(2-PAM·Cl)等治疗组进行观察.(2)通过DTNB比色法测定兔血中ChE活力单位,绘制在体毒效动力学曲线和离体实验的量效曲线.(3)用微量DTNB法测定DDVP在体或离体抑制小鼠脑ChE活力,观察Nef和2-PAM·Cl对脑组织内被抑制ChE的重活化作用.(4)采用交叉中毒试验观察对氯汞苯甲酸(PCMB)和DDVP对电鳐胆碱酯酶(t-ChE)及人红细胞胆碱酯酶(he-ChE)活性区域的抑制作用及DMPS的复活效能,判断巯基是否为he-ChE的活性部位;再用Nef、2-PAM·Cl与二巯基丙磺酸钠(DMPS)分别实验检查被PCMB或DDVP抑制的he-ChE活性恢复情况,分析Nef重活化ChE作用机制与其对ChE巯基活性影响的相关性.(5)以小鼠全血ChE为酶源,毒扁豆碱(Ese)与DDVP为酶抑制剂,2-PAM·Cl和Nef为重活化药,并以改进的微量DTNB法测定ChE活力,观察DDVP与Ese交叉中毒酶抑制率变化,判断两者的作用部位.比较Nef与2-PAM·Cl重活化DDVP或Ese抑制ChE的作用,探讨Nef重活化ChE的作用机制.
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