【摘 要】
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目的:本实验旨在研究索拉非尼(sorafenib)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266的增殖与凋亡的作用及其相关作用机制,为MM的临床治疗寻求新的分子靶向药物及提供理论依据。方法:用
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目的:本实验旨在研究索拉非尼(sorafenib)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266的增殖与凋亡的作用及其相关作用机制,为MM的临床治疗寻求新的分子靶向药物及提供理论依据。方法:用MTT法检测MM细胞株U266在不同浓度索拉非尼作用下增殖的抑制率;用流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;设计VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β、c-KIT等索拉非尼作用靶点引物,运用Q-PCR技术对索拉非尼处理过的MM细胞株U266进行检测,初步确定索拉非尼的作用靶点;最后用Western-blot方法检测蛋白的表达情况以验证Q-PCR筛选结果。结果:不同浓度索拉非尼对MM细胞株U266的抑制增殖和促进细胞凋亡的作用有差异,实验结果证实其抑制率呈现出一定程度的时间-浓度依赖性(P﹤0.05),其凋亡率呈现浓度依赖性(P﹤0.05),不同浓度索拉非尼作用于MM细胞48 h之后,与对照组比较VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β、c-KIT的mRNA表达均下调,其中VEGFR-3、PDGFR-β下调最为显著,且经Western-blot检测出VEGFR-3、PDGFR-β的蛋白表达情况与Q-PCR的结果相一致(P﹤0.05)。结论:索拉非尼体外能够抑制MM细胞株U266的增殖并加速细胞凋亡,且相关机制可能与索拉非尼能抑制MM细胞株U266表面相关受体(如:VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β)被激活有关。
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