本试验室从长期受苯酚污染的土样中筛选到一株高效的苯酚降解细菌GXPO4,通过16S rDNA序列同源性比较,确定其为琼氏不动杆菌。本研究以GXP04为研究对象,根据苯酚羟化酶所共有的保守序列合成了一对引物,以GXP04总DNA为模板,通过PCR反应,扩增出684bp的同源片段。对该DNA序列测序,并通过序列分析表明,该片段与已报道的抗辐射性不动杆菌(Acinetobacter radioresistens)的苯酚羟化酶基因有97%的同源性。以此DNA片段为探针,通过Southern blot的方法,从用不同酶切的GXP04总DNA中获得阳性印迹,确认其苯酚羟化酶基因的位置,进而以pLAFR3为载体构建了GXP04的基因组文库。通过菌落原位杂交,获得21个可能含有苯酚羟化酶基因的阳性克隆。通过TAIL-PCR、Southern blot等一系列方法最终确定其中的8个转化子含有完整的苯酚羟化酶基因。对该苯酚羟化酶基因的核苷酸和氨基酸序列进行分析,并对其蛋白质基本性质进行预测,为进一步研究苯酚羟化酶和构建高效苯酚降解基因工程菌打下基础。