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目的：1.检测视神经脊髓炎（NMO）患者血清及脑脊液中B淋巴细胞活化因子（BAFF）的水平，探讨BAFF能否作为一种生物标记物，以及在鉴别诊断及推测疾病活动性中所起的作用；2.检测NMO患者外周血中CD1d(hi) CD5+CD19+调节性B细胞的比例，探讨调节性B细胞能否作为NMO和多发性硬化(MS)鉴别诊断的生物标记物，并为发现二者存在不同的免疫机制提供更多理论依据；3.建立NMO模型，验证水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)的致病性，并为进一步研究提供平台；4.观察脂多糖(LPS)预处理对AQP4-Ab致病性的影响，探讨小胶质细胞激活在NMO发病中的作用及可能的机制。方法：1.收集2012年4月至2013年10月间就诊于解放军总医院门诊及住院部的NMO和MS患者的临床资料，所有患者均为急性复发期。其中NMO44例，MS38例。对照组血清标本来自体检中心健康正常人，共30例，脑脊液标本来自同期住院的非炎性神经系统疾病患者，共15例，采用ELISA法检测脑脊液及血清中BAFF的水平，流式细胞仪技术检测外周血中CD1d(hi)CD5+CD19+调节性B细胞的比例。2.利用原代细胞培养技术，培养新生大鼠皮层细胞，AQP4-Ab阳性的NMO患者血清进行干预，通过免疫荧光技术检测培养细胞中MAP2、GFAP、CD11b的表达情况，以观察神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞形态的改变，建立NMO模型。3.在模型的基础上，给予LPS预处理，通过免疫荧光技术检测培养细胞MAP2、GFAP、CD11b的表达变化情况，通过ELISA法检测培养上清中TNF-α、IFN-γ水平的变化情况。结果：1. NMO组、MS组和对照组血清中BAFF水平分别为250.2±126.9pg/ml、249.6±130.7pg/ml和222.9±126.1pg/ml,三组间两两比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。 NMO组、 MS组和对照组脑脊液中BAFF水平分别为525.8±230.0pg/ml、298.4±141.9pg/ml和141.4±76.2pg/ml，三组两两比较，NMO组和MS组脑脊液中BAFF水平较对照组明显增高，NMO组脑脊液中BAFF水平较MS组明显增高（P <0.05）。且NMO组、MS组的脑脊液中BAFF水平与EDSS评分存在相关性，EDSS评分越高，其脑脊液中BAFF水平越高（r值分别为0.887和0.885）。但是,NMO组脑脊液中BAFF水平与AQP4抗体滴度之间不具有相关性。2. NMO组、MS组及对照组外周血CD1d(hi) CD5+CD19+调节性B细胞细胞占CD19+B细胞的比例分别为（7.94±4.16）%、（20.61±11.13）%和（19.35±8.04）%，占淋巴细胞的比例分别为（1.61±0.89）%、（2.70±1.21）%和（2.52±1.27）%，三组比较，NMO组外周血CD1d(hi) CD5+CD19+细胞比例最低（P <0.05），MS组与对照组比较无明显变化(P＞0.05)。AQP4-Ab+NMO组和AQP4-Ab-NMO组CD1d(hi) CD5+CD19+细胞占CD19+B细胞的比例分别为（6.8%，1.33-14.2%）和（8.8%，3.5-20.0%），占淋巴细胞的比例分别为（1.43%，0.2-1.9%）和（2.60%，1.07-4.32%），两组比较，AQP4-Ab+NMO组CD1d(hi) CD5+CD19+细胞比例明显偏低（P <0.05）。3.原代培养新生大鼠皮层细胞，经AQP4抗体阳性患者血清进行诱导，星形胶质细胞肿胀,神经元固缩。小胶质细胞胞体明显增大，有伪足样突起。与空白对照组和正常血清组比较，AQP4抗体阳性血清组GFAP阳性细胞、CD11b阳性细胞中心聚焦区域面积明显增大，MAP2阳性细胞中心聚集区域面积明显减小，GFAP、CD11b阳性细胞周围投射长度明显增长，MAP2阳性细胞周围投射长度明显缩短（P <0.05）。4. LPS预处理后, AQP4抗体阳性血清对星形胶质细胞和神经元的损伤进一步加重，星形胶质细胞及神经元发生凋亡。与单纯AQP4-Ab阳性血清组比较，LPS预处理+AQP4-Ab阳性血清组MAP2、GFAP免疫荧光阳性中心聚集区域面积明显缩小，MAP2免疫荧光阳性周围投射区域长度明显缩短，GFAP免疫荧光阳性周围投射区域无法测量， CD11b周围投射区域长度明显增加（P <0.05）。CD11b免疫荧光阳性中心聚集区域面积无明显变化(P＞0.05)。脂多糖预处理6h后，培养上清液中TNF-α水平明显升高，而IFN-γ的水平未发生明显变化。结论：1.脑脊液中BAFF水平可作为NMO和MS鉴别诊断的生物标记物，并在判定疾病活动性中具有一定价值。2.外周血中CD1d(hi) CD5+CD19+调节性B细胞可作为NMO和MS鉴别诊断的生物标记物，并提示NMO与MS，AQP4-Ab+NMO与AQP4-Ab-NMO的免疫机制不同。3.利用AQP4抗体阳性血清与原代培养的新生大鼠脑皮层细胞，可建立NMO模型。4.LPS预处理后，可激活小胶质细胞，进一步增强了AQP4抗体的致病性。其中可能涉及了复杂的免疫机制，促炎症细胞因子TNF-α扮演了重要角色。